Среда эндо инструкция по применению

Агар Эндо-ГРМ Оболенск – Цена за упаковку 0,25 кг

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований «Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (Агар Эндо-ГРМ Оболенск)»

1. НАЗНАЧЕНИЕ

«Агар Эндо-ГРМ» предназначен для бактериологических целей при диагностике инфекционных заболеваний «in vitro».

2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

«Агар Эндо-ГРМ» представляет собой смесь сухих компонентов в виде мелкодисперсного гигроскопичного порошка сиреневого цвета.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные потребности для роста, дифференциации и ингибиции отдельных видов микроорганизмов.

2.2. СОСТАВ НАБОРА

«Агар Эндо-ГРМ» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:

3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

«Агар Эндо-ГРМ» обеспечивает на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов Shigella sonnei «S form», Shigella dysenteriae I 1362, Escherichia coli 3912/41 (055:К59), Escherichia coli 168/59 (0111:К58) через 18-20 ч инкубации при температуре (371) С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10-6, разбавленного стерильным 0,9 %-ным раствором хлористого натрия в соотношении 1:1 (условно разведение 10-7).

Колонии: S. dysenteriae I 1362 бесцветные, круглые, прозрачные, диаметром 1,0-
1,5 мм;

Колонии E. coli 3912/41 (055:К59) – круглые, малинового цвета с металлическим блеском, диаметром 2,0-3,0 мм;

Колонии S. sonnei «S form» бесцветные или слегка розового цвета, со слабо выраженным центром, круглые, прозрачные, диаметром 1,5-2,5 мм;

Колонии E. coli 168/59 (0111:К58) – круглые, малинового цвета, металлический блеск колоний может быть неясно выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.

Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда должна обеспечивать четкую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве 0,1 мл каждой микробной смеси S. sonnei “S form” и E. coli 168/59 (0111:К58), S. dysenteriae I 1362 и E. coli 3912/41 (055:К59) из разведения 10-6 через 18-20 ч инкубации при температуре (371) С.

Ингибирующие свойства среды. Питательная среда должна полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-1 через 18-20 ч инкубации при температуре (371) С.

4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

​ Термостат обеспечивающий температуру 37±1 С

​ Весы лабораторные 2 класса точности

​ Автоклав

​ Пробирки стеклянные вместимостью – 10 мл

​ Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл

​ Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл

​ Чашки Петри стерильные

​ Вода дистиллированная

​ Колбы

​ Воронки стеклянные

6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Исследования образцов проводятся по соответствующим Методическим указаниям и ГОСТам.

7.1. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

Приготовление «Агара Эндо-ГРМ».

Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2-3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, снова доводят до кипения, охлаждают до температуры 45-50 С и разливают в стерильные чашки Петри слоем 5-6 мм. После застывания среды чашки подсушивают.

Готовая питательная среда в чашках Петри прозрачная, розового цвета. Среду необходимо использовать в день приготовления. Хранить до посева в темноте !

8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Наличие характерно окрашенных колоний энтеробактерий на плотной питательной среде в результате роста культур, выделенных из исследуемых образцов, регистрируют визуально.

9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.

10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

«Агар Эндо-ГРМ» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.

Срок годности – 2 года.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества «Агара Эндо-ГРМ» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Скачать Инструкцию

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

Агар Эндо-ГРМ Оболенск

Описание

Визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.

Форма выпуска

Выпускается в полиэтиленовых банках по 150, 200, 250 г, а также по 200 г в пакетах из трехслойной ламинированной бумаги с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки).

Назначение

Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (агар Эндо) предназначена для выделения энтеробактерий из исследуемого материала и их дифференциации по признаку ферментации лактозы. Изделие для диагностики ин витро. Функциональное назначение — вспомогательное средство в диагностике.

Характеристика набора

Выделение энтеробактерий осуществляется микробиологическим методом.

Принцип метода — визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.

«Агар Эндо» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:

— Питательный агар сухой (ФС 42-3520-98) — 26,5
— ЭКДА (регламент производства № 782-98) — 1,22
— Фуксин основной (ТУ 6-09-1785-93) — 0,23
— Сахар молочный (ТУ 10 РФ 1090-92) — 10,7
— Динатрия фосфат (ТУ 64-6-254-88) — 0,48
— Натрия сульфат безводный (ГОСТ 5644-76) — 0,83
— Натрий углекислый (ГОСТ 83-79) — 0,03

Выпускается в полиэтиленовых банках по 150, 200, 250 г, а также по 200 г в пакетах из трехслойной ламинированной бумаги с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки). Ремонту и обслуживанию не подлежит.

Специфическая активность (показатели чувствительности, скорости роста и стабильности основных биологических свойств микроорганизмов).

Среда должна обеспечивать рост тест-штаммов Shigella sonnei «S.form», Shigella dysenteriae 1 1362, Escherichia coli 3912/41 (055:K59), Escherichia coli 168/59 (0111:K58) на всех засеянных чашках Петри при посеве по 0,1 мл микробной взвеси каждой культуры из разведения 10′⁶, разведенной стерильным 0,9 % раствором натрия хлорида в соотношении 1:1, через 18-20 ч инкубации при температуре (37+1) °С. Колонии S.dysenteriae 1 1362 должны быть бесцветными, прозрачными, круглыми, диаметром 1,0- 2,0 мм, колонии S.sonnei «S.form» могут быть слега розоватого цвета, со слабо выраженным центром, диаметром 1,5-2,5 мм. Колонии E.coli 3912/41 (055:К59) — красного цвета, с металлическим блеском, круглые, диаметром 2,0-3,0 мм. Колонии E.coli 168/59 (0111:К58) — красного цвета, круглые, металлический блеск может быть менее выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.

Дифференцирующие свойства среды.

Среда должна обеспечивать четкую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл каждой микробной смеси тест-штаммов: S.sonnei «S.form» и E.coli 168/59 (0111.К58), S.dysenteriae 1 1362 и E.coli 3912/41 (055.К59) в равных объемах из разведения 10′⁶через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Показатель ингибиции.

Среда должна полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10″¹
через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Меры предосторожности

Потенциальный риск применения изделия — класс 1.

При работе необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности», СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»; СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней; СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III — IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». Требуется соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».

Оборудование и реагенты

Термостат, обеспечивающий температуру (37+1) °С
Флаконы стеклянные, вместимостью 1 л
Цилиндр стеклянный мерный, вместимостью 1000 мл
Чашки Петри
Вода дистиллированная
Спиртовка
0,9 % раствор натрия хлорида

Анализируемые пробы

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

Проведение анализа

«Агар Эндо» в количестве 40 г тщательно размешивают в 1 л воды дистиллированной, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и снова доводят до кипения. Среду охлаждают до температуры 45-50 °С, перемешивают и, соблюдая правила асептики, разливают в стерильные чашки Петри (ГОСТ 23932-90Е) слоем 3-4 мм. После застывания среды чашки подсушивают при температуре (37+1) °С в течение 40-60 мин. Готовая среда в чашках Петри — прозрачная, розового цвета. Готовую среду используют в день приготовления, хранят до посева в защищенном от света месте.

Учет результатов

Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями (М., 1984 г.) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г. №533 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно­диагностических учреждений».

Условия хранения и эксплуатация набора

Хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 °С.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

Что такое эндоагар?

• Агар Эндо, также известный как среда Эндо, представляет собой микробиологическую питательную среду, разработанную Endo для дифференциации грамотрицательных бактерий на основе их способности ферментировать лактозу, подавляя при этом рост грамположительных бактерий. Первоначально он был разработан для изоляции Сальмонелла typhi, но в настоящее время он в основном используется в качестве колиформной среды.
• Одной из примечательных особенностей Endo Agar является то, что он ингибирует грамположительные бактерии без использования солей желчных кислот, которые традиционно использовались для этой цели. Вместо этого Эндо добился ингибирования путем включения в среду сульфита натрия и основного фуксина.
• Полученный агар Эндо, также называемый фуксиносульфитным и инфузионным агаром, оказался эффективным при выделении бацилл брюшного тифа. За прошедшие годы в среду были внесены модификации для повышения ее производительности и специфичности.
• Endo Agar в настоящее время рекомендуется в качестве селективной среды для подтверждения предполагаемого теста на представителей группы кишечной палочки как в клинических, так и в неклинических образцах. Он поддерживает рост большинства грамотрицательных микроорганизмов, подавляя рост грамположительных микроорганизмов.
• В контексте эндоагара колиформные организмы относятся к тем, которые ферментируют лактозу в среде. Эти ферментирующие лактозу микроорганизмы, такие как Escherichia coli, образуют колонии с зеленым металлическим блеском. С другой стороны, микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, включая виды Salmonella, образуют прозрачные и бесцветные колонии.
• Бледно-розовый цвет агара Эндо помогает дифференцировать микроорганизмы, ферментирующие лактозу, и микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, что делает его ценной средой для идентификации колиформных бактерий в микробиологических лабораториях.

Принцип эндоагара

Принцип эндоагара основан на нескольких ключевых компонентах и ​​реакциях, которые позволяют избирательно дифференцировать бактерии на основе их лактозы. брожение способности. Вот основные принципы Эндо-агара:

1. Пептон: Среда содержит пептон, который обеспечивает азот, углерод, витаминыи минералы, необходимые для роста бактерий.
2. Селективность: сульфит натрия и основной фуксин добавляются в среду для избирательного ингибирования роста грамположительных организмов.
3. Альдегидная реакция: лактозоположительные колонии окрашиваются в красный цвет из-за альдегидной реакции с сульфитом натрия и основным фуксином. Эта реакция происходит, когда бактерии, ферментирующие лактозу, производят альдегиды во время ферментации лактозы.
4. Металлический блеск: когда организмы ферментируют лактозу, производство альдегидов приводит к появлению металлического блеска. Этот блеск особенно выражен у Escherichia coli, где фуксин кристаллизуется и придает колониям постоянный зеленоватый металлический блеск.
5. Бесцветные колонии: бактерии, не ферментирующие лактозу, не производят альдегидов, в результате чего они образуют на среде прозрачные и бесцветные колонии.
6. Розовые колонии: БГКП, ферментирующие лактозу бактерии, образуют розовые колонии из-за ферментации лактозы.

Наблюдая за цветом и внешним видом колоний на агаре Эндо, можно получить ценную информацию о способности бактерий к ферментации лактозы:

• Бесцветный, бежевый или нерозовый рост указывает на то, что лактоза не используется, что указывает на грамотрицательную неколиформную инфекцию. организм.
• Хороший рост с розово-красным цветом указывает на то, что лактоза утилизируется, что предполагает наличие грамотрицательного колиформного организма.
• Хороший рост с ярким металлическим блеском на розово-красных колониях свидетельствует о высокой степени утилизации лактозы и указывает на наличие грамотрицательного колиформного организма.

Важно отметить, что если в среде наблюдается плохой рост или его отсутствие, вполне вероятно, что микроорганизм является грамположительным, а не грамотрицательным.

Эти принципы эндоагара позволяют микробиологам различать бактерии, ферментирующие лактозу, и бактерии, не ферментирующие лактозу, особенно колиформы, что помогает в идентификации и классификации организмов в лаборатории.

Состав эндоагара

Конечный рН (при 25°С): 7.5±0.2

Подготовка к использованию эндо-агара

Чтобы приготовить и использовать Endo Agar, выполните следующие действия:

1. Разведите 41.5 г агара Endo в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте смесь до кипения, обеспечив полное растворение среды.
3. Среду стерилизуют автоклавированием при давлении 15 фунтов (121°C) в течение 15 минут.
4. Хорошо перемешайте среду, прежде чем разливать ее в стерильные чашки Петри.
5. Примечание. Если затвердевшая питательная среда выглядит слишком красной, вы можете удалить ее, добавив несколько капель (максимум 1 мл на литр) свежеприготовленного 10% раствора сульфита натрия. После добавления раствора сульфита натрия снова прокипятите среду.
6. Нанесите образец штрихом на поверхность агара Эндо как можно скорее после его получения в лаборатории. Техника посева в основном используется для выделения чистых культур из образцов, содержащих смешанную флору.
7. При культивировании непосредственно с тампона прокатите тампон по небольшому участку поверхности агара на краю, а затем сделайте штрих с этой инокулированной области.
8. Рекомендуется также инокулировать неселективную среду, такую ​​как колумбийский агар с 5% овечьей крови, для выявления других микроорганизмов, присутствующих в образце.
9. После посева инкубируйте чашки при 35 ± 2°C в течение 18–24 часов. Убедитесь, что чашки защищены от света во время инкубации.

Выполнение этих шагов позволит подготовить и правильно использовать Endo Agar в лабораторных условиях. Он позволяет селективно выделять и идентифицировать колиформные бактерии, ферментирующие лактозу, при этом подавляя рост грамположительных микроорганизмов.

Результаты и характеристики колоний различных организмов на эндоагаре

Интерпретация результатов на агаре Эндо включает изучение характеристик роста и колоний различных организмов. Вот интерпретация результатов на Endo Agar:

1. Клебсиелла аэрогенес: Организм показывает хороший буйный рост с розовыми колониями.
2. фекальный энтерококк: Наблюдается слабый рост, с небольшими розовыми колониями.
3. Кишечная палочка: наблюдается хороший буйный рост организма, колонии кажутся розовыми или розово-красными с металлическим блеском.
4. Клебсиелла пневмонии: Микроорганизм демонстрирует хороший буйный рост с розовыми мукоидными колониями.
5. Протей обыкновенный: Микроорганизм демонстрирует хороший буйный рост, колонии кажутся бесцветными или бледно-розовыми.
6. Синегнойной палочки: Микроорганизм демонстрирует хороший буйный рост, а колонии кажутся бесцветными и неправильной формы.
7. Сальмонелла тифи: Микроорганизм демонстрирует хороший обильный рост, а колонии кажутся бесцветными или бледно-розовыми.
8. Энтеробактерии клоаки: Организм хорошо растет, колонии розового цвета.
9. Сальмонелла тифимуриум: Микроорганизм показывает хороший буйный рост, и колонии кажутся бесцветными.
10. Сальмонелла энтеритидис: Микроорганизм демонстрирует хороший буйный рост, а колонии кажутся бесцветными.
11. Shigella Флекснера: Микроорганизм демонстрирует хороший буйный рост, колонии кажутся бесцветными.
12. Энтеробактер аэрогенес: Микроорганизм демонстрирует рост от хорошего до превосходного, а колонии имеют зеленый металлический блеск.

Наблюдая за ростом и характеристиками колоний на агаре Эндо, можно различать разные микроорганизмы на основе их способности ферментировать лактозу и полученного цвета колоний. Организмы, ферментирующие лактозу, обычно образуют розовые или красные колонии, тогда как организмы, не ферментирующие лактозу, образуют бесцветные колонии. Металлический блеск, наблюдаемый у некоторых организмов, особенно у Escherichia coli, является отличительной чертой.

Эти интерпретации помогают в идентификации и дифференциации различных грамотрицательных бактерий, в том числе представителей группы кишечных палочек и видов сальмонелл, на агаре Эндо.

Контроль качества

Контроль качества агара Эндо включает несколько аспектов, включая культуральную реакцию, внешний вид, гелеобразование, цвет и прозрачность приготовленной среды, реакцию, рН, а также рост и культуральные характеристики конкретных организмов.

• Культуральный ответ: культуральные характеристики эндоагара проверяют после инкубации при 35-37°C в течение 18-24 часов. Культуральный ответ дает ценную информацию о том, как среда поддерживает рост различных микроорганизмов.
• Внешний вид: Endo Agar выглядит как однородный сыпучий порошок от светло-розового до пурпурного цвета. Эта физическая характеристика помогает идентифицировать и отличить агар от других сред.
• Гелеобразование: гелеобразующие свойства агара Endo описываются как прочные и сравнимые с гелем 1.5% агара. Эта информация обеспечивает правильное затвердевание агара и обеспечивает соответствующую консистенцию для микробного роста.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: после приготовления среда имеет оранжево-розовый цвет и кажется прозрачной или слегка опалесцирующей. В чашках Петри могут образовываться мелкие осадки. Эти визуальные подсказки необходимы для оценки качества среды и определения наличия каких-либо аномалий или загрязнений.
• Реакция: Реакция 4.15% водного раствора агара Эндо при 25°C показывает рН 7.5±0.2. Уровень pH является важным параметром для мониторинга, так как он влияет на рост и биохимические реакции микроорганизмов.
• рН: приемлемый диапазон рН для агара Эндо составляет 7.30-7.70. Эта спецификация гарантирует, что pH среды находится в оптимальном диапазоне для поддержки роста целевых организмов и ингибирования роста нежелательных.

Инокулят организма (КОЕ), восстановление роста, цвет колонии и культуральный ответ: Несколько специфических организмов используются для тестирования контроля качества Endo Agar. К этим организмам относятся:

• Bacillus subtilis subsp. Спизизенни ATCC 6633
• Энтерококк фекальный ATCC 29212
• Escherichia coli ATCC 25922
• Клебсиелла пневмония ATCC 13883
• Протей обыкновенный ATCC 13315
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
• Сальмонелла тифи ATCC 6539
• Золотистый стафилококк подвид золотистый АТСС 25923
• Энтеробактер клоаки ATCC 13047
• Сальмонелла тифимуриум ATCC 14028
• Сальмонелла энтеритидис ATCC 13076
• Шигелла flexneri ATCC 12022

Для каждого организма оценивают размер инокулята (КОЕ), восстановление роста, цвет колонии и реакцию культуры. Эти параметры помогают определить, поддерживает ли агар рост микроорганизмов, есть ли ингибирование роста и характерный внешний вид колоний.

В целом, контроль качества Endo Agar гарантирует, что среда соответствует определенным критериям с точки зрения физических свойств, pH и ее способности поддерживать рост целевых организмов. Эти тесты имеют решающее значение для поддержания согласованности и надежности микробиологических лабораторных процедур.

Использование эндо-агара

Endo Agar имеет несколько важных применений в микробиологии. Вот основные области применения эндоагара:

• Дифференциация лактозоферментирующих и нелактозоферментирующих организмов: Эндоагар обычно используется для дифференциации кишечных организмов, ферментирующих лактозу, и неферментирующих лактозу, особенно при подтверждении предполагаемого теста на колиформы. Организмы, ферментирующие лактозу, образуют розовые или красные колонии, в то время как микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, образуют бесцветные колонии на агаре Эндо.
• Микробиологическое исследование воды и сточных вод: Endo Agar рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) в качестве важной среды для микробиологического исследования воды и сточных вод. Он помогает в обнаружении и подсчете колиформных бактерий, включая фекальные колиформы, после предполагаемого теста на колиформы.
• Анализ молочных продуктов и продуктов питания: Endo Agar используется для микробиологического исследования молочных продуктов и различных пищевых продуктов. Он используется для обнаружения и выделения колиформных и фекальных колиформных бактерий, которые могут указывать на наличие фекального загрязнения или плохую гигиену во время обработки.
• Подтверждение качества питьевой воды: Endo Agar играет важную роль в подтверждении обнаружения и подсчета колиформных бактерий в питьевой воде. Он используется после первоначального предполагаемого теста на колиформы для получения более точных результатов и обеспечения безопасности питьевой воды.
• Подсчет БГКП в воде: Endo Agar используется для подсчета колиформных бактерий в воде методом мембранной фильтрации. Этот метод включает фильтрацию известного объема воды через мембранный фильтр, который затем помещают на агар Эндо, чтобы обеспечить рост бактерий группы кишечной палочки. Образовавшиеся колонии можно подсчитать, чтобы определить концентрацию кишечной палочки в пробе воды.

Селективность и дифференциальные свойства эндоагара делают его ценной средой для различных микробиологических анализов, особенно при оценке качества воды, молочных продуктов и безопасности пищевых продуктов.

Ограничения эндоагара

Endo Agar, несмотря на свою полезность, имеет определенные ограничения, которые необходимо учитывать. Вот ограничения Endo Agar:

• Рост других грамотрицательных бактерий и дрожжей: Хотя Endo Agar в первую очередь селективен для Enterobacteriaceae, на этой среде могут расти и другие грамотрицательные бактерии и дрожжи. Поэтому необходимы дополнительные биохимические тесты для дальнейшего подтверждения и идентификации конкретных организмов.
• Чувствительность к свету: Endo Agar следует защищать от воздействия света. Воздействие света может вызвать фотоокисление, которое может снизить продуктивность среды и повлиять на интерпретацию результатов. Важно правильно хранить пластины и обращаться с ними, чтобы сохранить их целостность.
• перегревание: Следует избегать перегрева среды, так как это может снизить ее производительность. В процессе подготовки и стерилизации необходимо соблюдать осторожность, чтобы убедиться, что среда нагревается надлежащим образом, не вызывая чрезмерного повреждения или изменения.
• Требуется дополнительное подтверждение: Хотя эндоагар полезен для дифференциации микроорганизмов, ферментирующих и не ферментирующих лактозу, для подтверждения необходимы дополнительные биохимические тесты. Эти тесты помогают идентифицировать определенные виды бактерий и отличать их от других подобных организмов.
• Подавление блеска: Если используемый инокулят слишком тяжелый, он может подавить характерный металлический блеск, производимый колиформами, ферментирующими лактозу. Это может повлиять на интерпретацию результатов, поэтому важно обеспечить правильную плотность инокулята для точных наблюдений.
• Нетипичный внешний вид колонии: иногда неколиформные микроорганизмы могут образовывать колонии с типичным металлическим блеском, что может привести к неправильной интерпретации. Точно так же колиформные организмы могут образовывать атипичные колонии, включая темно-красные колонии или колонии с ядрами без характерного блеска. Эти различия во внешнем виде колоний могут усложнить интерпретацию результатов и потребовать дополнительного тестирования для точной идентификации.

Учитывая эти ограничения, крайне важно использовать Endo Agar в сочетании с другими селективными и подтверждающими тестами, чтобы обеспечить точную идентификацию и дифференциацию микроорганизмов.

FAQ

Рекомендации

• http://exodocientifica.com.br/_technical-data/M029.pdf
• https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8974
• https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/343/460/278-endo-agar-104044.pdf
• https://www.neogen.com/categories/microbiology/m-endo-agar/
• https://www.merckmillipore.com/Web-IN-Site/en_US/-/EUR/ViewCountrySelection-RedirectToCountry?CountryCode=IN&CookieAcceptance=accepted&bd=1&ga=null&SourceDomain=Merck-US-Site&TargetURL=https%3A%2F%2Fwww.emdmillipore.com%2FUS%2Fen%2Fproduct%2FENDO-agar%2CMDA_CHEM-104044&ReferrerURL=https%3A%2F%2Fwww.google.com%2F
• http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0479&c=UK&lang=EN
• https://www.carlroth.com/com/en/media-for-coliforms-ecoli/endo-agar-(base)/p/x920.1
• https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/IFU1420.pdf
• https://assets.fishersci.com/TFS-Assets/LSG/manuals/IFU453942.pdf

Описание

Инструкция по применению  набора реагентов «Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (Агар Эндо)»

НАЗНАЧЕНИЕ

«Агар Эндо»  предназначен  для выделения  энтеробактерий из исследуемого материала  и их дифференциации по признаку ферментации лактозы.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Выделение  энтеробактерий осуществляется микробиологическим методом.

Принцип метода – визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.

СОСТАВ

«Агар Эндо» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:

Питательный агар сухой                                               — 26,5

ЭКДА                                                                              — 1,22

Фуксин основной                                                           — 0,23

Сахар молочный                                                            — 10,7

Динатрия фосфат                                                            — 0,48

Натрия сульфит безводный                                           — 0,83

Натрий углекислый                                                        — 0,03

АНАЛИТИЧЕСКИЕ  ХАРАКТЕРИСТИКИ

Специфическая активность (показатели чувствительности, скорости роста и стабильности основных биологических свойств микроорганизмов).

Среда  должна обеспечивать рост тест-штаммов Shigella sonnei «S.form», Shigella dysenteriae 1 1362, Escherichia coli 3912/41 (O55:K59), Escherichia coli 168/59 (O111:K58) на всех засеянных чашках Петри при посеве по 0,1 мл микробной взвеси каждой культуры из разведения 10^-6, разведенной стерильным 0,9 % раствором натрия хлорида в соотношении 1:1, через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.   Колонии S.dysenteriae 1 1362 должны быть бесцветными, прозрачными, круглыми, диаметром 1,0-2,0 мм, колонии S.sonnei «S.form» могут быть слегка розоватого цвета, со слабо выраженным центром, диаметром 1,5-2,5 мм. Колонии Е.coli 3912/41 (О55:К59) – красного цвета, с металлическим блеском, круглые, диаметром 2,0-3,0 мм. Колонии Е.coli 168/59 (О111:К58) —  красного цвета, круглые, металлический блеск  может быть менее выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.

Дифференцирующие свойства среды.

Среда  должна  обеспечивать четкую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл каждой микробной смеси тест-штаммов: S.sonnei «S.form» и Е.coli 168/59 (О111:К58), S.dysenteriae 1 1362 и Е.coli 3912/41 (О55:К59) в равных объемах  из разведения 10^-6 через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Показатель ингибиции

Среда   должна полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10^-1 через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981)

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

• Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С
• Флаконы стеклянные, вместимостью 1 л
• Цилиндр стеклянный мерный, вместимостью 1000 мл
• Чашки Петри
• Вода дистиллированная
• Спиртовка
• 0,9 % раствор натрия хлорида

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

«Агар Эндо» в количестве 40 г тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и снова доводят до кипения. Среду охлаждают до температуры 45-50 °С, перемешивают и, соблюдая правила асептики, разливают в стерильные чашки Петри слоем 3-4 мм. После застывания среды чашки подсушивают при температуре  (37±1) °С в течение 40-60 мин. Готовая среда в чашках Петри  — прозрачная, розового цвета. Готовую среду используют в день приготовления, хранят до посева в защищенном от света месте.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г №533 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-диагностических учреждений».

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ

«Агар Эндо» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от  2 до 25 ºС.

Срок годности – 3 года со дня изготовления.  «Агар Эндо»   с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

Рекламации на качество набора  реагентов «Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая агар Эндо» в течение срока годности следует направлять в адрес производителя: ФГУП «НПО «Микроген», Минздрава  России, Россия 115088, г. Москва,   ул.1-ая Дубровская, д.15, тел.(495)710-37-87. Адрес производства: Россия, 367010, Республика Дагестан,  г. Махачкала, ул.А.Султана , 13  б   тел. 8722 55 82 32

Агар Эндо