Железо глюкозо лактозный агар с мочевиной инструкция

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для бактериологических исследований

«Питательная среда для первичной идентификации энтеробактерий сухая»

(Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной)

 НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Питательная среда для первичной идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной)» предназначен для первичной идентификации микроорганизмов по их способности утилизировать мочевину, ферментировать лактозу, глюкозу, образовывать газ и сероводород.

1. характеристика

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной представляет собой смесь сухих компонентов в виде мелкодисперсного, гигроскопичного, светочувствительного порошка светло-желтого цвета.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

2.1. Принцип действия

Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные потребности для роста и проявления биохимических свойств отдельных видов микроорганизмов.

2.2. Состав

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:

1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной обеспечивает рост энтеробактерий (иерсиний, шигелл, сальмонелл, протеев и т.д.) через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С с проявлением типичных биохимических характеристик.

1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

• Термостат обеспечивающий температуру 37 и 28 °С
• Весы лабораторные 2 класса точности
• Автоклав
• Пробирки стеклянные
• Пипетки стеклянные, позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
• Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
• Чашки Петри стерильные
• Воронки стеклянные

1. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной  и клинической микробиологии.

1. Проведение АНАЛИЗа

7.1. Приготовление Железо-глюкозо-лактозного агара с мочевиной.

Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, стерилизуют автоклавированием при температуре 110 °С в течение 15 мин. После стерилизации охлажденную до температуры 40-50 °С среду разливают по 7 мл в стерильные пробирки и скашивают, оставляя столбик высотой 25-30 мм.

Готовая среда имеет красный цвет.

Готовую среду можно использовать в течение 3-х сут после её приготовления при условии хранения в темном месте при температуре 18-25 °С или в течение 14 суток при температуре хранения 2-8 °С..

7.2. Взятие, посев исследуемого материала проводят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (Москва, 1984)  и Приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г  № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».

7.3. Выделенную культуру засевают в две пробирки с Железо-глюкозо-лактозным агаром с мочевиной, нанося материал сначала штрихом на скошенную поверхность, а затем уколом в столбик среды, не касаясь дна пробирки. Инкубируют при температуре (37±1) ° С  в течение 18-20 ч.

1. УЧЕТ И РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С по способности микроорганизмов расщеплять мочевину (скошенная часть среды и столбик ярко-малинового цвета), ферментировать лактозу (пожелтение скошенной части среды), глюкозу (пожелтение столбика), образовывать газ (разрыв среды в столбике или наличие пузырьков) и продуцировать сероводород (почернение среды в столбике). Отрицательная реакция характеризуется  отсутствием соответствующих признаков.

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее чем в трех повторностях.

1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.

Срок годности – 1 год. Среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества набора реагентов «Питательная среда для первичной идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной)» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Скачать Инструкцию 

Скачать РУ

Скачать прайс-лист

Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной

Питательная среда для первичной идентификации энтеробактерий сухая (Железо–глюкозо–лактозный агар с мочевиной) предназначена для первичной идентификации микроорганизмов по их способности утилизировать мочевину, ферментировать лактозу, глюкозу, образовывать газ и сероводород.

Представляет собой смесь сухих компонентов в виде мелкодисперсного, гигроскопичного, светочувствительного порошка светло–желтого цвета.

Фасовка в полиэтиленовую банку по 250 г

Состав (г/л):

Панкреатический гидролизат рыбной муки с тиосульфатом натрия – 20,5 г

Д–лактоза – 20,0 г

Д–глюкоза – 1,0 г

Натрия фосфорнокислый двузамещенный – 1,0 г

Калия фосфат однозамещенный – 1,3 г

Натрий хлористый – 5,0 г

Железа окисного цитрат – 0,3 г

Феноловый красный – 0,05 г

Мочевина – 10,0 г

Натрий углекислый – 0,01–0,25 г

Агар микробиологический – 10,0 ± 3,0 г

Хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищённом от света месте при температуре 2–30 °С в течение всего срока годности – 1 год.

Питательная среда для первичной идентификации энтеробактерий сухая Железо-глюкозо-лактозный агар с мочевиной, предназначена для идентификации микроорганизмов по их способности утилизировать мочевину, ферментировать лактозу, глюкозу, образовывать газ и сероводород.

Представляет собой мелкодисперсный порошок кремового цвета, гигроскопичный, светочувствительный.

Приготовление: Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, стерилизуют автоклавированием при температуре 110°С в течение 15 мин. После стерилизации охлажденную до температуры 40-50°С среду разливают по 7 мл в стерильные пробирки и скашивают, оставляя столбик высотой 25-30 мм. Готовая среда имеет красный цвет.

Стерильную среду можно использовать в течение 2-х недель при условии ее хранения при температуре 2-8C или в течение 3 сут при температуре хранения 18-25 °С (хранить пробирки следует в темном месте).

Взятие, посев исследуемого материала производят в соответствии с «Методическими указаниями по микробио­логической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (Москва, 1984) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 “Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений”.

Учет результатов проводят визуально через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1)°С по способности микроорганизмов расщеплять мочевину (скошенная часть среды и столбик ярко-малинового цвета), ферментировать лактозу (пожелтение скошенной части среды), глюкозу (пожелтение столбика), образовывать газ (разрыв среды в столбике или наличие пузырьков) и продуцировать сероводород (почернение среды в столбике). Процесс образования сероводорода протекает в кислой среде, поэтому почернение столбика свидетельствует о расщеплении глюкозы. В случае отрицательной реакции среда остается красной, либо скошенная часть приобретает  красно-малиновый оттенок.

Препарат необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 С.     

Цена дана с учетом НДС 10 % за 1 упаковку 250 г.

Описание

Инструкция по применению набора реагентов «Питательная среда   для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)»

1.НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Питательная среда для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)» предназначен для идентификации энтеробактерий по их способности ферментировать глюкозу и лактозу, образовывать сероводород и расщеплять мочевину (при добавлении реактива к среде ex temporo).

2.ХАРАКТЕРИСТИКА

2.1.Принцип метода.

Принцип метода – визуальное обнаружение энтеробактерий, выросших на питательной среде  при посеве исследуемых образцов.

2.2.Состав набора.

Набор реагентов    представляет  собой  комплект    из двух  компонентов:  № 1 для нижнего   и  № 2  для верхнего слоев среды, получаемый   смешиванием сухих ингредиентов из расчета г/л:

     Компонент №1 «Нижний слой»                                                  Компонент  № 2 «Верхний слой»

Экстракт кормовых дрожжей                                 0,15                                Экстракт кормовых дрожжей          0,35

Пептон сухой ферментативный                                                                    Д(+)-лактоза                                      9,52

для бактериологических целей                              3,0                                  Динатрия фосфат обезвоженный     3,22

Д-глюкоза                                                                1,2                                   Соль Мора                                         0,56

Натрий серноватистокислый безводный               2,04                               Феноловый красный

Динатрия фосфат обезвоженный                           0,60                                водорастворимый                             0,056

Феноловый красный водорастворимый                 0,02                              Натрия додецилсульфат                  0,042

Бриллиантовый зеленый                                         0,001                             Агар микробиологический          6,30±0,1

Агар микробиологический                                     1,5±0,1          

Набор реагентов «Питательная среда   для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)»  выпускается в виде комплекта из двух банок с каждым компонентом среды: компонент № 1 «Нижний слой»  — по 160 г, компонент № 2 «Верхний слой»  по 250 г  в   полиэтиленовых банках вместимостью 350 мл соответственно.

1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРСТИКИ НАБОРА.

 3.1. Специфическая активность (чувствительность среды, скорость роста и дифференцирующие свойства).

При посеве в 3 пробирки со средой по одной бактериологической петле, диаметром  2 мм питательная среда  должна  обеспечивать рост каждого из тест-штаммов: Shigella flexneri 1а 8516, Escherichia coli  3912/41 (О55:К59),  Proteus vulgaris НХ 19 222, Citrobacter freundii 58/57,  Salmonella typhi Н-901 ГДР/ГИСК через 20-24 ч инкубации при температуре (37±1) °С   c соответствующим проявлением тестов:

Примечание.

1) Ферментация глюкозы:

+  (положительная реакция)– пожелтение столбика среды (для штамма Shigella flexneri 1а 8516 возможно пожелтение среды «по уколу»);

Г  (газообразование) – разрывы (пузырьки) внутри столбика среды

2) Ферментация лактозы:

+ (положительная реакция) – пожелтение скошенной части среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие пожелтения скошенной части среды.

3) Образование сероводорода:

+ (положительная реакция) – почернение верхней части столбика среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие почернения среды

4) Расщепление мочевины:

+ (положительная реакция) – окрашивание в малиновый цвет всей или только  скошенной части среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие малинового окрашивания среды.

4.МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

5.ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

• Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С

• Флаконы стеклянные
• Пробирки стерильные
• Пипетки стеклянные стерильные
• Спиртовка
• Вода дистиллированная
• 50% раствор мочевины

6.АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

7.ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1.Приготовление  питательной среды.

Компонент №1 «Нижний слой».  Компонент в количестве, указанном на этикетке, размешивают в 300 мл дистиллированной  воды,  кипятят 1-2 мин, охлаждают  до температуры 48-52 °С, добавляют 2,4 мл 50 % раствора мочевины*, разливают по 2 мл стерильной пипеткой в стерильные пробирки   и оставляют для застывания «столбиком».

Компонент №2 «Верхний слой». Компонент в количестве, указанном на этикетке, размешивают в 700 мл дистиллированной воды, кипятят 1-2 мин, охлаждают до температуры 48-52 °С, разливают стерильной пипеткой по 4,5 мл в стерильные пробирки поверх застывшего «нижнего слоя» и скашивают, оставив столбик высотой около 20 мм.

Готовая среда красного цвета. Готовая среда может быть использована в течение месяца при условии хранения при температуре 2-8 °С.

*Примечание

Приготовление 50 %  раствора мочевины: 50 г мочевины

ТУ  (6-09-2117) растворяют в 50 г  дистиллированной

воды, выдерживают 2-3 сут при температуре 18-22°С для

самостерилизации. Готовый раствор можно хранить при

температуре 18-22 °С в течение месяца.

Для проверки стерильности обоих компонентов среды по 5 пробирок с отдельно разлитыми «нижним» и «верхним» слоями среды  выдерживают  при температуре (37±1) °С в течение 40-48 ч. (Наличия роста микроорганизмов и изменения цвета среды не должно быть).

7.2. Посев  исследуемого  материала проводить  согласно  «Методическим  указаниям по микробиологической  диагностике  заболеваний,  вызываемых  энтеробактериями» (М,, 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»

8.РЕГИСТРАЦИЯ   РЕЗУЛЬТАТОВ

Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.

1. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет  результатов  производят   согласно «Методическим указаниям  по микробиологической  диагностике  заболеваний,  вызываемых  энтеробактериями» (М,, 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»

1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Набор реагентов «Питательная среда для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар двухслойный)» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от  2 до 25 ºС.

Транспортирование должно проводиться при температуре от 2 до 25 ºС  всеми видами крытого транспорта.

Срок годности –  2 года со дня изготовления. Набор реагентов с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.

Рекламации на качество набора реагентов в течение срока годности следует направлять в адрес производителя:   ФГУП «НПО «Микроген»,115088, г. Москва, ул. 1-я Дубровская, 15, тел.(495)  710-37-87.  Адрес производства:  367010, г. Махачкала, ул.А.Султана , 13  б   тел. 8722 55 82 32.

Железо-глюкозо-лактозный агар