Витекс священный трава инструкция по применению

​Витекс священный: от античных легенд к нейрофизиологии дофаминергического ответа на стрессовые стимулы

Статьи

Опубликовано в журнале:
Женская клиника, № 1, сентябрь, 2020, с. 17–23

Бурчаков Д.И.¹, Ших Е.В.^2
1НОЧУ ДПО «Высшая медицинская школа», Москва, Российская Федерация.
²Институт профессионального образования, ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет) Минздрава России, Москва, Российская Федерация.

Резюме. Витекс священный используют в медицине уже две тысячи лет, но только в XX веке нам стали открываться нейрофизиологические механизмы его действия. В данном нарративном обзоре представлена краткая история медицинского применения витекса священного и его многообразных благотворных клинических эффектов. Далее рассматривается устройство центрального дофаминергического ответа на стресс, который можно смягчить с помощью лекарственных средств на основе экстракта плодов витекса священного. Также дан краткий комментарий к текущему состоянию клинических исследований по этой теме.
Ключевые слова: витекс священный, история медицинского применения, дофаминергический ответ на стресс, клинические исследования.

Vitex agnus castus: from the antique legends to neurophysiology of dopaminergic stress response

Burchakov D. I.¹, Shikh E. V.^2
1Higher medical school, Private educational institution, Moscow, Russian Federation.
²Institute of professional education of I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russian Federation.

Resume. Vitex agnus castus is a herbal medicine with a history spanning two thousand years. But only the 20^th century saw the discovery of the neurophysiology behind it’s effects. This narrative review presents a short history of Vitex agnus castus in medicine, it’s beneficial effects aplenty. Next it goes to examine the structure of the central dopaminergic stress response, which can be alleviated by medicine, based on the extract of the fruits of Vitex agnus castus. There is also a comment on the current state of the research in this area.
Key words: Vitex Agnus castus, the history of medical use, the dopaminergic response to stress, clinical studies.

Введение
Витекс священный (Vitex agnus castus) используется в традиционной, народной и специализированной медицине уже две тысячи лет — начиная с эпохи античности. C 1950-х годов экстракты плодов витекса священного начали систематически изучать. Исследователи признают, что точный и полный механизм действия нам неизвестен, хотя бы потому, что в стандартизированных экстрактах содержатся десятки веществ. Желающим ознакомиться с метаболомным анализом экстракта витекса священного рекомендуем соответствующий обзор И.Ю. Торшина и соавторов [1].

В данной статье мы сначала рассмотрим историю витекса священного, которая наглядно показывает, как в разные эпохи врачи эмпирически открывали его возможности в клинике. Далее мы рассмотрим нейрофизиологию дофаминергического ответа ЦНС на стрессовые стимулы. Это позволит понять, почему препараты витекса демонстрируют эффективность в отношении предменструального синдрома и стресс-зависимых нарушений менструального цикла в клинических исследованиях.

Биологическая и медицинская биография витекса священного
Витекс священный — это древовидный куст с длинными матово-зелеными листьями и многочисленными лиловыми цветами. Его небольшие плоды по форме и вкусу напоминают черный перец. Растение обычно растет около рек и водоемов, но при этом неприхотливо и способно расти даже на сухой и каменистой почве. По современной классификации витекс священный относится к семейству Яснотковых (Lamiaceae, Губоцветных). К этому же семейству относятся мелисса, шалфей, розмарин и базилик.

Витекс священный — представитель рода Витекс. Все представители этого рода (Vitex agnus castus, Vitex trifolia, Vitex lucens, Vitex negundo ) являются листопадными или вечнозелеными деревьями и кустарниками. Они схожи по внешнему виду и биохимическим свойствам своих экстрактов. При этом именно витекс священный — наиболее изученный представитель рода, который наиболее широко применяется в фармацевтике.

Витекс священный произрастает преимущественно в субтропиках: на юге Европы, в Средиземноморье, на южном побережье Крыма и Кавказе. Именно в этом ареале сформировалась и развивалась античная культура, ставшая прообразом и предтечей всей европейской цивилизации.

Первыми витекс священный начали использовать древние греки, вившие из него корзины. Они же дали ему имя agnos, или agnos castos, то есть символизирующий целомудрие. Плиний Старший писал, что афинские женщины в дни священного праздника богини Деметры устилали свои ложа листьями растения [2]. В эти дни празднующим женщинам следовало воздерживаться от любовного соития, а эти листья, как тогда считалось, отваживали мужчин. Так растение стало символом священного целомудрия.

Древние римляне дали ему латинское имя vitex, от глагола viere (вить). Под этим же именем он вошел в ботаническую классификацию Карла Линнея, Species plantarum, в 1753 году [3]. За две тысячи лет он обрел и другие названия: витекс обыкновенный, прутняк обыкновенный, Авраамово дерево, целомудренник и монашеский перец. Последнее имя из этого перечня обязано своим происхождением средневековым монахам. Следуя античной легенде, они использовали растение для смирения страстей и в качестве приправы.

История медицинского применения витекса священного. Сегодня экстракт витекса священного воспринимается в первую очередь как дофаминомиметик растительного происхождения. При этом даже беглый анализ истории показывает, что целителям прошлого известны были и другие его свойства. Рассмотрим наиболее заметные вехи развития представлений о действии растения.

В Корпусе Гиппократа и других работах этой эпохи (примерно 400 год до н.э.) витекс священный рекомендовали использовать преимущественно для лечения женских болезней. При этом отмечали, что он способен бороться с воспалением и улучшать заживление ран. В своем трактате «О лекарственных средствах» (De Materia Medica, примерно 55 год н.э.) Диоскорид Педаний расширяет и углубляет эти показания. Диоскорид указывает, что при внутреннем применении, например в сочетании с вином, витекс священный стимулирует выделение материнского молока, ослабляет воспаление матки, благотворно влияет на менструальную функцию. При наружном применении он также ослабляет воспаление и помогает от ран и ядовитых укусов. Помимо перечисленных выше свойств растению уже традиционно приписывали способность смирять избыточное плотское влечение.

После падения Римской империи центр интеллектуальной культуры на многие столетия сместился на Восток. Витекс упоминается в работах АльКинди, основателя арабской философии, примерно в 900 году н.э., а также и в более поздних трактатах, например в 1200 году н.э. В арабском мире витекс священный использовали в первую очередь как успокаивающее средство. Аль-Кинди советовал смешивать его с другими травами, чтобы получить средство, «исцеляющее» безумие, сумасшествие и эпилепсию. В этот же период витекс распространяется за пределы своего естественного ареала. Уже в начале XIII века его используют врачи в Уэльсе.

В период Ренессанса и вплоть до окончания эпохи Нового времени витекс оставался популярным медицинским средством. Он упоминается в трактате известного английского гербалиста Джерарда (1633) как средство от воспаления матки, как средство, стимулирующее менструацию, и как средство от головной боли. По этим же показаниям его широко применяли в Европе XVII-XIX веков. Отметим, что в этот период растение постепенно утрачивало позиции в официальной медицине. Так, например, оно упоминается в первом издании британской Pharmacopoeia Londinensis в 1618 году, но к началу XVIII века надолго пропадает из фармакопей, чтобы вернуться в них уже в XX веке. Зато все эти годы витекс оставался популярным народным средством.

В первой половине XX века витекс священный начали систематически изучать биохимики и фармакологи. Стало очевидно, что известные с античного периода свойства растения обусловлены входящими в его состав молекулами. В 1953 году было проведено первое клиническое исследование экстракта плодов витекса священного, положившее начало его пути в современную гинекологию [4].

Современные препараты витекса священного. В традиционной и народной медицине витекс священный применяется в разных формах: порошок, настойка, отвар и т.д. Используют все части растения: листья, цветы, плоды. Однако официальным лекарственным растительным сырьем является только экстракт плодов витекса священного, из которого производят лекарственные формы в виде таблеток, покрытых оболочкой, или спиртовой раствор [5].

В Российской Федерации экстракт витекса священного представлен в составе нескольких БАД и лекарственного средства «Циклодинон» (компания Bionorica, Германия). С 2018 года «Циклодинон» является препаратом безрецептурного отпуска. Данный препарат используют для лечения нарушений менструального цикла и предменструального синдрома. На фармацевтическом рынке Российской Федерации представлен также препарат «Мастодинон», относящийся согласно регистрационному удостоверению к группе гомеопатических лекарственных препаратов. В составе «Мастодинона» экстракт плодов ви текса священного содержится в десятичном разведении, доступен для количественного определения, в связи с чем препарат следует рассматривать больше в качестве фитотерапевтического средства, нежели гомеопатического. Согласно показаниям к медицинскому применению, основанным на результатах клинических исследований, «Мастодинон» используется для лечения масталгии и диффузных форм доброкачественной дисплазии молочных желез.

Показания к применению лекарственных препаратов экстракта витекса священного базируются на данных клинических исследований и опыте традиционной медицины. К этим показаниям относят предменструальный синдром, нарушения менструального цикла и патологию молочной железы (мастодинию, фиброзно-кистозную мастопатию). В клинической практике витекс священный также применяется для прегравидарной подготовки и в комплексном лечении бесплодия, особенно ассоциированного с дисфункцией желтого тела. В народной медицине, которая в наши дни перекочевала со страниц журналов в интернет и социальные сети, витекс священный также широко обсуждается как средство для лечения симптомов СПКЯ, хотя тому пока нет весомого научного обоснования.

Состав экстракта витекса священного. Торшин И.Ю. и соавт. (2015) указывают, что в состав экстракта витекса священного входят следующие вещества [1]: 1) полифенолы, флавоноиды, О-дифенолы и антоцианы; 2) фитостероиды; 3) иридоидные гликозиды; 4) дитерпеноиды и лигнаны.

В составе витекса священного присутствуют вещества, известные и по другим лекарственным растениям: рутин, лютеолин, апигенин, кемпферол. Особый интерес же представляют вещества, которые характерны именно для рода витекс: витексин, витексилактон, кастицин, агнузид и др. Отметим, что кастицин, например, встречается и в других растениях (Eremophila mitchellii, Pluchea quitoc, Crataegus pinnatifida) [6], но в клинической практике используется именно в составе экстракта витекса священного. Это связано с двумя факторами.

Во-первых, экстракты лекарственных растений подлежат стандартизации. Это необходимо, чтобы гарантировать воспроизводимость фармакодинамического эффекта: только стандартизированный препарат будет раз за разом оказывать схожее по качеству и силе эффекта действие на пациента. Во-вторых, необычайно трудно и дорого создать промышленную производственную цепочку, которая уверенно воспроизводит нужное соотношение компонентов экстракта. Поэтому обеспечить высокие стандарты качества может только производитель, который контролирует все этапы производства: от выращивания сырья до упаковки лекарственных форм.

Отметим, что особенности сырья и производства, в частности применяемые экстрагенты, влияют на массу лекарственной формы и дозу препарата, которая обеспечивает значимый клинический эффект. Например, экстракт Ze 440 формуют в таблетки по 20 мг, а экстракт BNO 1095 — в таблетки по 4 мг. Их эффективность в клинических исследованиях сопоставима [7].

Нейрофизиология дофамина и стресса
Основной механизм действия экстракта витекса священного — дофаминомиметический, то есть он действует как агонист рецепторов дофамина [8]. Чтобы понять механизм действия витекса священного, следует сначала определиться с тем, как устроена и как работает дофаминергическая система. Это позволит более полно интерпретировать данные лабораторных и клинических исследований. У дофамина есть множество функций в головном мозгу и за его пределами. Но в мозгу существует не одна, а как минимум четыре дофаминергических системы. В нейрофизиологии их обычно называют путями [9].

Нигростриарный путь самый мощный из всех, отвечает за инициацию двигательной активности. Повышение активности дофамина в этой системе устраняет гипертонус мышц, избавляет человека от заторможенности и скованности. Если нейроны этого пути гибнут, у человека развивается болезнь Паркинсона.

Мезолимбический и мезокортикальный пути отвечают за регуляцию памяти, эмоций, поведения, ощущения удовольствия и награды. Повышение активности дофамина в нейронах этого пути приводит к тому, что человек чувствует себя более уверенным, более сильным, собранным, внимательным, возбужденным. Если же активность дофамина становится слишком высокой, у человека формируется патологическое возбуждение и падает концентрация внимания, появляется ощущение взвинченности или раздерганности. В крайних случаях гиперактивность этих нейронов вызывает психоз.

Тубероинфундибулярный путь (нейроны TIDA) связывает гипоталамус с гипофизом. Дофамин, который выделяют эти нейроны через портальную систему, достигает лактотрофных клеток гипофиза. Там он связывается с D₂-рецепторами дофамина и через них ингибирует аденилатциклазу, снижая уровень цАМФ, и тем самым снижает секрецию пролактина. Этот механизм позволяет удерживать уровень пролактина в физиологических пределах. Отметим, что и сам пролактин по петле отрицательной обратной связи изменяет активность тирозингидроксилазы в нейронах TIDA, повышая активность дофамина [10].

Таким образом, эти пути отвечают за три основные функции дофамина в нервной системе: контролировать движение, контролировать возбуждение, контролировать уровень пролактина. Все эти три функции тесно связаны со стрессовым ответом. Возникает резонный вопрос: если дофамин регулирует ответ на стресс, то почему он также связан с функциями удовольствия и награды? Ответ прост: дофамин повышается в ответ на любые стимулы. Это универсальная реакция, которая помогает и убежать от опасности, и догнать что-то желаемое.

Однако дофаминергические пути реагируют на стимул по-разному. Нигростриарный путь активируется, чтобы человеку было проще двигаться — нападать или убегать. Мезокортикальный и мезолимбический пути также активируются и подстегивают высшую нервную деятельность, чтобы найти выход из ситуации. А вот нейроны TIDA в ответ на стресс снижают свою активность. Как только это происходит, гипофиз получает возможность выделять больше пролактина, что ведет к повышению его содержания в системном кровотоке и реализации адаптогенного эффекта. В частности, такой выброс пролактина активирует иммунную систему и оказывает анксиолитический эффект [11]. Все это -элементы состояния повышенной готовности, которое и является по сути стрессовой реакцией, то есть подготовкой к действиям в условиях стресса.

Отметим, что когда стресс связан с угрозой для жизни, то на первое место выходят другие нейромедиаторы: адреналин и норадреналин. Опосредованный ими стресс помогает физически выжить. Дофамин же в большей степени связан с социальными стрессовыми реакциями. Выделяясь в ответ на стресс, он помогает узнать новое и научиться не попадать в неприятные или опасные ситуации. В пользу этой гипотезы говорит, в частности, тот факт, что у людей, подвергнутых стрессу, синтез дофамина коррелирует с субъективным восприятием угрозы. Иными словами, чем тревожнее социальная ситуация для человека (независимо от реальной опасности), тем интенсивнее будет дофаминовый ответ [12].

Механизмы действия экстракта витекса священного
Тубероинфундибулярный путь. Витекс священный снижает избыточную секрецию пролактина через активацию нейронов TIDA. W. Wuttke и соавт. в серии исследований показали, что компоненты экстракта плодов витекса священного действительно действуют как агонисты дофамина. Они связываются преимущественно с D₂-рецепторами разных путей. Поэтому эффект витекса зависит от того, на какой путь он действует [13].

Напомним, что в ответ на стресс нейроны TIDA снижают свою активность. В результате лактотрофные клетки гипофиза выделяют больше пролактина. Компоненты экстракта плодов витекса священного связываются с рецепторами дофамина на лактотрофах. Основными действующими веществами здесь являются дитерпеноиды, которые обладают двумя эффектами. Во-первых, они напрямую связываются с рецепторами дофамина и активируют их. На пострецепторном уровне это вызывает ингибирование аденилатциклазы и снижает выработку цАМФ, от которого зависит секреция пролактина. Во-вторых дитерпеноиды, как и дофамин, ингибируют форсколин, который стимулирует выработку цАМФ [13, 14]. Сумма двух этих эффектов и позволяет экстракту плодов витекса священного снижать уровень пролактина.

In vitro этот механизм показан на клеточной культуре лактотрофов. Если в носителе культуры нет агонистов рецепторов дофамина, то клетки активно выделяют пролактин. Если же в культуру добавляют экстракт плодов витекса священного, то секреция пролактина дозозависимо снижается [13]. In vivo за счет этого механизма нормализуется уровень пролактина у женщин со стресс-зависимой олигоменореей и функциональной гиперпролактинемией.

Балансирующее влияние на мезокортикальный и мезолимбический пути. Известно, что экстракт витекса священного эффективен в лечении предменструального синдрома. Например, в одном исследовании было показано, что лечение витексом в течение 3 месяцев (1 таблетка в день) улучшило состояние женщин с ПМС. Изменения в основной группе превзошли изменения плацебо. Интересно, однако, то, что женщины отметили улучшение не только симптомов, связанных с молочной железой. Они стали менее раздражительными, их реже беспокоил гнев, настроение стало более устойчивым [15]. Эти эффекты трудно объяснить только лишь снижением пролактина. Как еще может действовать витекс?

Компоненты экстракта плодов витекса священного — агонисты рецепторов дофамина. При этом если они воздействуют на D₂-рецепторы тубероинфундибулярного пути (TIDA), то они также будут действовать и на другие пути. Влияние витекса на нигростриарный путь если и существует, то клинически незначимо. На этот путь приходится до 80% совокупной мощности дофаминергических систем организма, и поэтому в терапевтических дозах витекс действует не настолько сильно, чтобы влиять на моторику и мышечный тонус.

А вот мезокортикальный и мезолимбический пути скорее всего реагируют на витекс священный. Напомним, что эти пути в ответ на стресс начинают активно выделять дофамин. Так они повышают эффективность высшей нервной деятельности. Но в ряде случаев эта активность становится избыточной. Например, в ситуации, когда внешний стимул действует длительно, возбуждение становится избыточным. Поведенчески это проявляется у человека несобранностью, трудностью концентрации, а иногда и раздражительностью, злостью, перепадами настроения. Все эти симптомы — классические примеры психосоматических проявлений ПМС. При длительной экспозиции стрессовыми стимулами возможна сенсибилизация ЦНС к дофамину, и в этом случае даже на небольшие стимулы человек отвечает избыточным возбуждением [9].

Компоненты экстракта витекса священного в такой ситуации будут конкурировать с дофамином за его рецепторы. Поскольку их аффинность к рецепторам меньше, чем у дофамина, то в результате они будут ослаблять его эффект. Таким образом, экстракт плодов витекса священного балансирует интенсивность воздействия эндогенного дофамина и силу дофаминергического ответа на стресс. Там, где дофамин действует чересчур активно, витекс священный ослабит его эффект. Там, где действия дофамина не хватает (в тубероинфундибулярном пути и лактотрофах), он его поддержит.

Опиоидэргический эффект. Среди соматических симптомов ПМС одно из ведущих мест занимает масталгия. Встречаются, однако, и другие болевые симптомы. Они также реагируют на терапию экстрактом витекса священного, что было показано в консервативном метаанализе соответствующих исследований [16]. Но эту реакцию трудно объяснить одним только снижением уровня пролактина. Стабилизация центрального дофаминергического ответа на стресс, вероятнее всего, вносит свой вклад в уменьшение боли. Однако и это не представляется достаточным объяснением.

Интересно, что компоненты экстракта витекса священного, в частности флавоноид кастицин, проявляют опиоидэргическую активность. Известно три типа опиатных рецепторов (μ -, δ — и к-рецепторы). Активация всех трех видов снижает интенсивность боли. При этом мет-энкефалин (более селективный к S-рецепторам) и динорфин (более селективный к к-рецепторам) способны частично подавлять пульсовый выброс ЛГ. Динорфин также способен вызывать диуретический эффект, полезный при задержке жидкости [17-19]. Опиодэргическая (т.е. эндорфиноподобная) активность компонентов экстракта витекса священного имеет относительно невысокую интенсивность. Поэтому она лишь дополняет и усиливает основной, дофаминомиметический эффект.

Обзор клинических исследований по Витексу священному и ПМС
Эффективность различных экстрактов витекса священного оценивают в двойных слепых рандомизированных плацебо-контролируемых исследованиях. За последние годы вышло несколько систематических обзоров, в первую очередь посвященных витексу священному и ПМС, а также предменструальному дисфорическому расстройству и циклической масталгии [7, 16, 20]. Все они показывают, что экстракт плодов витекса священного превосходит плацебо или не уступает другим методам лечения, например селективным ингибиторам обратного захвата серотонина (СИОЗС).

При этом авторы указывают на ряд ограничений. В частности, в разных исследованиях используют разные клинические популяции, разные экстракты плодов витекса священного и разные конечные точки для оценки исходов интервенции. Рассмотрим, в частности, четыре представительных исследования (табл. 1). Подробный разбор этих и других исследований доступен в оригинальном систематическом обзоре R. Cerqueira и соавт. (2017) [7].

Таблица 1.

Рандомизированные исследования эффективности экстракта плодов витекса священного*П — проспективное, Р — рандомизированное, ДС — двойное слепое, ПК — плацебо-контролируемое, МЦ — многоцентровое

Важно отметить, что все адекватные по дизайну и мощности клинические исследования проведены на стандартизированных экстрактах. Поэтому, выбирая препарат для конкретной пациентки, следует использовать только лекарственные средства, изготовленные с учетом стандартов надлежащей производственной практики (Good Manufacturing Practice, GMP). В Российской Федерации из таковых доступен только экстракт BNO 1095 (Циклодинон®, компания Бионорика). При этом необходимо помнить, что, согласно закону о «Лекарственных средствах», биологически активные добавки к пище содержат активные вещества в количествах, которые не являются достаточными для оказания фармакологического эффекта.

Заключение
Экстракт плодов витекса священного действует как комплексный дофаминомиметик, и этот эффект дополнительно усилен опиодэргическим действием. Исследования продолжаются, но уже сейчас очевидно, что клинический эффект экстракта обусловлен его балансирующим влиянием на дофаминергический ответ на стресс. Витекс священный (Циклодинон®) не может заменить собой синтетические агонисты дофамина или СИОЗС, но это и не требуется. Его ниша в клинике, обоснованная клиническими исследованиями, -это предменструальный синдром, стресс-зависимые нарушения цикла и другие проявления нарушенной адаптации, с которыми так часто сталкивается современная женщина. В комбинации же с другими действующими веществами (Мастодинон®) он может применяться при масталгии и мастопатии.

Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.

Информация об авторах
Бурчаков Денис Игоревич, доцент кафедры эндокринологии, НОЧУ ДПО «Высшая медицинская школа», ORCID: 0000-0001-9081-9041.
Адрес: 107023, Москва, ул. Малая Семеновская, д. 3А, стр. 2.
Ших Евгения Валерьевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней, директор Института профессионального образования, ФГА ОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)» Минздрава России, ORCID: 0000-0001-6589-7654.
Адрес: 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.

Литература

1. Торшин И.Ю., Громова О.А., Лиманова О.А. Систематический анализ состава и механизмов молекулярного воздействия стандартизированных экстрактов Vitex Agnus-castus. Трудный пациент [Internet]. 2015; 13(1-2): 19-29.
2. Pliny The Elder. Natural History. Vol. 24. MA: Harvard University Press; 1938.
3. Hobbs C.R. The chaste tree: Vitex agnus castus. Pharm Hist [Internet]. 1991; 33(1): 19-24.
4. Bautze H.J. Untersuchungen uber die Beeinflussung der Stilleistung durch Agnus castus. Med Welt. 1953; 7: 189-90.
5. Committee on Herbal Medicinal Products (HMPC). European Union herbal monograph on Vitex agnus-castus L., fructus [Internet]. 2018 [cited 2020 Jul 23].
6. Chan EW.C., Wong S.K., Chan HT. Casticin from Vitex species: a short review on its anticancer and anti-inflammatory properties. J Integr Med [Internet]. 2018 May; 16(3): 147-52.
7. Cerqueira R.O., Frey B.N., Leclerc E., Brietzke E. Vitex agnus castus for premenstrual syndrome and premenstrual dysphoric disorder: a systematic review. Arch Womens Ment Health [Internet]. 2017 Dec; 20(6): 713-9.
8. Sliutz G., Speiser P., Schultz A.M., Spona J., Zeillinger R. Agnus castus extracts inhibit prolactin secretion of rat pituitary cells. Horm Metab Res [Internet]. 1993 May; 25(5): 253-5.
9. Stanwood G.D. Chapter 9 — Dopamine and Stress. In: Fink G., editor. Stress: Physiology, Biochemistry, and Pathology [Internet]. Academic Press; 2019. p. 105-14.
10. Ho K., Kaiser U. Pituitary Physiology and Diagnostic Evaluation. In: Williams Textbook of Endocrinology. Elsevier; 2019. p. 185-235.
11. Lennartsson A-K., Jonsdottir I.H. Prolactin in response to acute psychosocial stress in healthy men and women. Psychoneuroendocrinology [Internet]. 2011 Nov; 36(10): 1530-9. Available from: http:// dx.doi.org/10.1016/j.psyneuen.2011.04.007.
12. Bloomfield M.A., McCutcheon R.A., Kempton M., et al. The effects of psychosocial stress on dopaminergic function and the acute stress response. Elife [Internet]. 2019 Nov 12; 8. Available from: http:// dx.doi.org/10.7554/eLife.46797.
13. Wuttke W., Jarry H., Christoffel V., Spengler B., Seidlova-Wuttke D. Chaste tree (Vitex agnus-cas tus)—pharmacology and clinical indications. Phytomedicine [Internet]. 2003 May; 10(4): 348-57.
14. Вуттке В., Зайдлова-Вуттке Д., Ярри Г., Артымук Н. Роль Витекса священного (Vitex agnus castus) в гинекологической эндокринологии. Гинекология. 2014; 1(1): 4-7.
15. Schellenberg R. Treatment for the premenstrual syndrome with agnus castus fruit extract: prospective, randomised, placebo controlled study. BMJ [Internet]. 2001 Jan 20; 322(7279): 134-7.
16. Ooi S.L., Watts S., McClean R., Pak S.C. Vitex Agnus-Castus for the Treatment of Cyclic Mast algia: A Systematic Review and Meta-Analysis. J Womens Health [Internet]. 2020 Feb; 29(2): 262-78.
17. Slizgi G.R., Ludens J.H. Studies on the nature and mechanism of the diuretic activity of the opioid analgesic ethylketocyclazocine. J Pharmacol Exp Ther [Internet]. 1982 Mar; 220(3): 585-91.
18. Kinoshita F., Nakai Y., Katakami H., Imura H. Suppressive effect of dynorphin-(1-13) on luteinizing hormone release in conscious castrated rats. Life Sci [Internet]. 1982 May 31; 30(22): 1915-9.
19. Webster D.E., He Y., Chen S-N., Pauli G.F., et al. Opioidergic mechanisms underlying the actions of Vitex agnus-castus L. Biochem Pharmacol [Internet]. 2011 Jan 1; 81(1):170-7.
20. Verkaik S., Kamperman A.M., van Westrhenen R., Schulte PFJ. The treatment of premenstrual syndrome with preparations of Vitex agnus castus: a systematic review and meta-analysis. Am J Obstet Gynecol [Internet]. 2017 Aug; 217(2): 150-66.
21. He Z., Chen R., Zhou Y., et al. Treatment for premenstrual syndrome with Vitex agnus castus: A prospective, randomized, multi-center placebo controlled study in China. Maturitas [Internet]. 2009 May 20; 63(1): 99-103.
22. Ma L., Lin S., Chen R., Zhang Y., et al. Evaluating therapeutic effect in symptoms of moderate to-severe premenstrual syndrome with Vitex agnus castus (BNO 1095) in Chinese women. Aust N Z J Obstet Gynaecol [Internet]. 2010 Apr; 50(2): 18993.
23. Ma L., Lin S., Chen R., Wang X. Treatment of moderate to severe premenstrual syndrome with Vitex agnus castus (BNO 1095) in Chinese women. Gynecol Endocrinol [Internet]. 2010 Aug; 26(8): 612-6.
24. Schellenberg R., Zimmermann C., Drewe J., Hoexter G., Zahner C. Dose-dependent efficacy of the Vi tex agnus castus extract Ze 440 in patients suffering from premenstrual syndrome. Phytomedicine [Internet]. 2012 Nov 15; 19(14): 1325-31.

Комментарии

(видны только специалистам, верифицированным редакцией МЕДИ РУ)

Торшин И.Ю., Громова О.А., Лиманова О.А.

Экстракты Vitex Agnus-castus применяются для регуляции менструального цикла, в терапии синдрома предменструального напряжения, лечения гиперпролактинемии и бесплодия. Метаболомные анализы показали наличие в экстрактах таких соединений как витексин, ротундифуран, кастицин, артеметин и ряда фитоэстрогенов. Компоненты экстрактов характеризуются противовоспалительным, антипролиферативным, антиоксидантным, противомикробным (в частности, противогрибковым), вазопротекторным и обезболивающим действием. Описаны роли компонентов экстрактов в модуляции опиоидных и дофаминовых рецепторов. В статье также рассмотрены эстроген-модулируюшие и антигиперпролактиновые свойства экстрактов витекса. 

Ключевые слова: стандартизированные экстракты Vitex Agnus-castus, фитоэстрогены, модуляция дофаминовых рецепторов, снижение гиперпролактинемии

Systematic Analysis of Composition and Molecular Mechanisms of Action of the Vitex Agnus-castus Standardized Extracts

I.Yu.Torshin, O.A.Gromova, O.A.Limanova

Extracts of Vitex Agnus-castus are used to regulate the menstrual cycle, in the treatment of premenstrual tension syndrome, hyperprolactinemia, and infertility. Vitex extracts component analysis showed the presence of such compounds as vitexin, rotundifuran, kastitsin, artemetin and some phytoestrogens. Extracts components are characterized with antiinflammatory, antiproliferative, antioxidant, antimicrobial (particularly antifungal), vasoprotective and analgesic effects. The role of the extracts components in modulation of opioid and dopamine receptors has been described. The paper also reviews estrogen modulating and anti-hyperprolactinemic properties of Vitex extracts.

Keywords: Vitex Agnus-castus, standardized extracts, phytoestrogens, dopamine receptors, modulation, hyperprolactinemia reduction.

Сведения об авторах:

Торшин Иван Юрьевич – к.м.н., консультант Российского центра института микроэлементов ЮНЕСКО, Москва

Громова Ольга Алексеевна – д.м.н., профессор кафедры фармакологии с клинической фармакологией, заведующая курсом клинической фармакологии ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Минсоцздравразвития РФ», заместитель директора по научной работе РСЦ Института Микроэлементов ЮНЕСКО, Москва

Введение

Преконцептуальная подготовка женщины к зачатию предполагает не только санацию очагов инфекции и поддержку микронутриентами, но и обеспечение тонкой настройки гормонального баланса. Избыток пролактина, дефицит эстрогенов и другие нарушения гормонального баланса часто сопровождают патологию женской репродуктивной сферы и, в частности, бесплодие.

Современным трендом в преконцептуальной подготовке женщин с нарушениями гормонального баланса является использование «мягких», но эффективных средств модуляции гормонального баланса, исключающих возможность тератогенеза. Одним из таких «мягких» средств является использование стандартизированных экстрактов Vitex Agnus-castus.

Vitex Agnus-castus (витекс обыкновенный, известен как «прутняк» и «Авраамово дерево», далее просто «витекс») – древовидный кустарник, произрастающий в субтропиках (южный берег Крыма, черноморское побережье Кавказа), на юге Европы, в Азии и северной Африке (рис. 1). Название растения, витекс, происходит от латинского vieo (вить, вязать), так как долгое время стебли растения использовались в плетении корзин [1]. Растение Vitex Agnus-castus известно, прежде всего, как лекарственное растение, хотя может применяться и в агропромышленности. В частности, эфирные масла Vitex Agnus-castus привлекательны для H.obsoletus (насекомого, переносящего возбудитель «желтой болезни» виноградников). В то же время, эфирные масла Vitex Agnus-castus обладают отчетливыми инсектицидными свойствами [2]. Таким образом, само растение может быть использовано в качестве растения-ловушки, защищающего виноградники от вредителей [3].

В современной и в народной медицине экстракты листьев и плодов растений рода Vitex используются для регуляции менструального цикла, снижения симптомов предменструального напряжения и тревоги, а также для лечения гормонально-зависимой формы угревой болезни [4]. Дофаминергические эффекты стандартизированных экстрактов витекса приводят к модулированию секреции пролактина, что исключительно важно для поддержания пиков фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и эстрогенов во время овуляции.

Вещества в составе экстрактов Vitex Agnus-castus включают:

1. полифенолы, флавоноиды, O-дифенолы и антоцианы [5];
2. фитостероиды (β-розастерол, β-ситостерол, β-даукостерол [6], в т.ч. такие экдистероиды, как витикостерон E [7]);
3. иридоидные гликозиды (например, аукубин и агнозид);
4. дитерпеноиды и лигнаны.

Комплексное действие экстрактов витекса обусловлено фармакологическими свойствами этих компонентов.

В настоящей работе представлены результаты систематизации данных современных метаболомных исследований состава экстрактов Vitex Agnus-castus и фармакологических свойств отдельных компонентов экстрактов. Затем, последовательно рассматриваются эстроген-модулируюшие, антигиперпролактиновые, дофаминергические, опиоидергические, противомикробные, противовоспалительные и противоопухолевые эффекты стандартизированных экстрактов витекса.

Метаболомные анализы состава экстрактов Vitex Agnus-castus

Экстракты Vitex Agnus-castus могут быть стандартизированы с использованием ряда характерных для данного растения «маркерных» соединений – гидроксибензойных кислот, агнузида, производных кемпферола, метокси-витексилактона и витетрифо лина D [8, 9]. Также для стандартизации экстрактов используются аукубин, ориентины, изовитексин и кастицин (рис. 2). Содержание этих соединений в различных стандартизированных экстрактах Vitex Agnus-castus приведено в табл. 1.

Современные технологии метаболомного анализа (т.е. параллельного определения многих веществ в одном образце) позволили систематизировать данные о составе стандартизированных экстрактов Vitex Agnus-castus. В ряде исследований было проведено метаболическое профилирование водно-спиртовых экстрактов на основе листьев, плодов и побегов с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии.

В составе экстрактов были обнаружены флавоны и другие группы соединений, характерные именно для рода Vitex (витексин, витекслактам, витексилактон, ротундифуран, витетрифолин D, кастицин, артеметин, витеагнузины, агнукастозиды [10–13]), фитоэстрогены β-ситостерол, витикостерон [9], а также полифенолы, повсеместно встречающиеся и в других растительных экстрактах (хлорогеновая кислота, лютеолин, апигенин, кемпферол, рутин, дикаффеилохининовые кислоты [8, 9]). Химические структуры характерных для Vitex Agnus-castus соединений в составе экстрактов приведены на рис. 3.

Вещества в составе экстрактов можно условно подразделить на полифенолы, флавоны и другие соединения «нелетучей» фракции и терпеноиды в «летучей» фракции («эфирные масла»). Фармакологические свойства соединений, обнаруженных в составе экстрактов витекса суммированы в табл. 2, 3.

Анализ 36 основных компонентов «летучей фракции» Vitex Agnus-castus показал, что она состоит преимущественно из соединений терпенового ряда (пинен, сабинен, филандрен и др.). В «летучую» фракцию (т.н. «эфирные масла») экстрактов Vitex Agnus-castus также входят 1,8-цинеол, α-терпинил ацетат, (Е)-кариофиллен, (Е)-фарнезин, бициклогермакрен, спатуленол и маноол [14, 15]. Для зрелых плодов основными компонентами являются сабинен (16–44%), 1,8-цинеол (8–15%), β-кариофиллен (2–5%) и транс-β-фарнезин (5–12%) [16]. В табл. 3 суммирована информация о компонентах эфирных масел V.Agnus-castus и их известных фармакологических свойствах. Заметим, что и другие представители рода Vitex (Vitex Negundo, Vitex Trifolia и др.) характеризуются весьма схожим составом эфирных масел [17–20].

Согласно анализу фармакологических свойств отдельных компонентов «нелетучей» и «летучей» фракций экстрактов Vitex Agnus-castus (см. табл. 2, 3), эти вещества характеризуются, в первую очередь, противовоспалительным, антипролиферативным, антиоксидантным, противомикробным (в частности, противогрибковым), кардио- и вазопротекторным действием (рис. 4). Ряд веществ также характеризуются антикоагулянтными и антиагрегантными, анксиолитическими, ранозаживляющими и антигиперпролактинемическими свойствами.

Противомикробные эффекты экстрактов витекса

В период прекоцептуальной подготовки важное значение придается санации имеющихся очагов инфекции, в том числе хронической. Поэтому подготовка к зачатию и беременности включает, по необходимости, антибактериальную терапию. Стандартизированные экстракты витекса характеризуются антибактериальными свойствами и в то же время безопасны для позитивной микробиоты кишечника.

Экстракты Vitex Agnus-castus и других представителей рода Vitex содержат значительное количество веществ с бактерицидными свойствами. Поэтому, экстракты витекса проявляют широкий спектр антимикробного действия (бактерицидное, антимикобактериальное, фунгицидное, антипротозойное).

В частности, для лабдановых дитерпеноидов в составе экстрактов был установлен противотуберкулезный эффект [21]. Флавонолы листьев Vitex Peduncularis тормозят рост лейшманий путем актива ции инфицированных ими макрофагов [22]. Экстракт листьев Vitex Negundo показал мощную антибактериальную активность (зона ингибирования роста – 9,9–22,6 мм, MIC: 200–3200 мкг/мл) против патогенных кишечных бактерий (болезнетворных штаммов кишечной палочки, холерного вибриона, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio mimicus, шигелл, протеобактерий) и в эксперименте значительно снижал смертность зараженных животных (p ˂ 0,0001) [23]. Заметим, что все эти кишечные патологии отрицательно сказываются и на соматическом, и на репродуктивном здоровье матери, стимулируют развитие внутриутробной инфекции у плода.

Эфирные масла V.Agnus-castus активны по отношению к типичным патогенным и условно-патогенным бактериям (за исключением листерий), причем эффект сопоставим с хлорамфениколом и амоксициллином. Наиболее уязвимыми оказались штаммы золотистого стафилококка (табл. 4) [15], которые, зачастую, устойчивы к большинству антибиотиков.

Противогрибковая активность эфирного масла листьев V.Agnus-castus (в количествах ~ 0,6 мкл/мл) наблюдалась для большинства штаммов таких мик роорганизмов как Т.mentagrophytes, Microsporum Canis, Trichophyton Rubrum, М.gypseum, Epidermophyton floccosum [14]. Применение противогрибковых антибиотиков в период преконцепции и в первом триместре запрещено, так как данные фармакологические препараты приводят к тератогенезу.

Эстроген-модулируюшие свойства экстрактов витекса

Экстракты Vitex Agnus-castus и других представителей Vitex характеризуются выраженной эстрогенмодулирующей активностью. Это обусловлено как вхождением в состав экстрактов фитоэстрогенов витикостерона [7], β-розатерола, β-ситостерола, β-даукостерола [6], так и эстрогено-подобными эффектами таких флавонов, как апигенин, витексин, пендулетин [24], а также кемпферола, ротундифурана и агнузида (см. табл. 2).

Эстрогенное действие экстракта Vitex Agnus-castus осуществляется посредством взаимодействий с рецепторами эстрогенов (ERa, ERb). Разделение экстрактов на фракции показало, что с рецепторами взаимодействуют, в частности, флавоноиды апигенин [24], ориентин и иридоид аукубин. Эстрогенная активность стандартизированных экстрактов достаточно высока и индуцирует значительное увеличение массы матки у крыс с удаленными яичниками, стимулируя также увеличение уровней прогестерона в плазме крови, уменьшение уровней лютеинизирующего гормона и пролактина [25].

Обладающие антипролиферативными свойствами лабдановый дитерпен ротундифуран и иридоид агнузид непосредственно воздействуют на уровни экспрессии эстрогеновых и прогестеронового рецепторов. При обработке клеток в культуре ротундифураном и агнузидом в течение 24 ч уровни мРНК эстрогеновых рецепторов альфа и рецепторов прогестерона повышались. Воздействие на эстрогеновые рецепторы подтверждалось тем, что эффект существенно снижался при использовании специфического анти-эстрогенового ингибитора ICI-182780 (рис. 5) [26].

Воздействие экстрактов витекса на эстрогеновую активность (в частности, повышение уровней рецепторов эстрогена и прогестерона) позволяет использовать эти растительные экстракты для терапии предменструального синдрома и для ослабления симптомов менопаузы [27].

Предменструальный синдром (ПМС) представляет собой сложное сочетание различных симптомов, включая перепады настроения, тревоги, депрессии, болезненность груди, заметно влияющие на повседневную жизнь и работоспособность. Рандомизированные исследования показали, что эффективность экстрактов Vitex Agnus-castus достоверно выше плацебо. При этом применение экстрактов витекса также нормализует избыточную секрецию пролактина, длительность укороченной лютеальной фазы менструального цикла, поднимает уровни прогестерона и 17β-эстрадиола в середине лютеальной фазы [28, 29], т.е. повышает репродуктивный потенциал. Соответствующие доказательные исследования и мировой опыт использования экстрактов витекса в клинической практике будут рассмотрены в отдельной статье.

Антигиперпролактиновый эффект экстрактов витекса

Отмеченная в клинических исследованиях эффективность экстрактов Vitex Agnus-castus в лечении масталгии связана, в частности, с торможением избыточного высвобождения пролактина вследствие блокировки дофаминовых рецепторов 2-го типа в клетках гипофиза [30].

Анализ обезболивающих и анти-гиперпролактинемических эффектов экстрактов витекса показал, что эти эффекты стимулируются компонентами флавоной фракции экстракта: флавоновая фракция показала более высокую степень обезболивания и более выраженное снижение уровня пролактина. Дальнейшее разделение (фракционирование) экстрактов показало, что флавоноид кастицин сам по себе может снижать аномальные высокие уровни пролактина сыворотки (на 50%, р ˂ 0,01) [31].

В эксперименте кастицин дозозависимо ингибирует высвобождение пролактина из клеток гипофиза при стимулировании эстрадиолом как in vitro, так и in vivo (рис. 6). Эти эффекты кастицина ассоциированы с ингибированием экспрессии гена рецептора ER и повышения экспрессии гена рецептора ERb [32]. При этом кастицин как бы «программирует» клетки гипофиза на секрецию нормальных, а не повышенных уровней пролактина (рис. 7).

Модуляция дофаминовых рецепторов

В последние годы уделяется большое значение балансу дофаминового нейромедиаторного обмена не только при лечении депрессии и алкоголизма, но и для поддержки репродуктивного здоровья. Компоненты экстрактов витекса защищают дофаминергические нейроны и модулируют активность рецепторов дофамина.

Так, рутин защищает дофаминергические нейроны от повреждений за счет ингибирования проапоптотических сигнальных путей JNK и р38 МАРК [34]. Хлорогеновая кислота и лютеолин ингибируют избыточную активацию микроглии и, тем самым, повышают выживаемость дофаминергических нейронов [35, 36]. Нейропротекторный эффект розмариновой кислоты отмечен в модели болезни Паркинсона (повреждение дофаминовых нейронов 6-гидроксидофамином) – нормализуются уровни дофамина и тирозингидроксилазы; восстанавливается физиологическое соотношение белков Bcl-2/Вах, регулирующих апоптоз [37].

Стандартизированные экстракты плодов Vitex Agnus-castus при высоких концентрациях (20–100 мг/мл) содержат кастицин, витексилактон, ротундифуран и дозозависимо вытесняют ингибиторы дофаминовых рецепторов типа D2 , D3 и D4 [38] (рис. 8).

Модуляцией дофаминовых рецепторов обусловлены, в частности, упомянутые ранее антигиперпролактиновые эффекты экстрактов витекса. В эксперименте внутрибрюшинные инъекции экстрактов также значительно снижали повышенные уровни тестостерона, что сходно с действием агонистов дофаминовых рецепторов [39].

Модуляция опиоидных рецепторов

Ряд компонентов экстрактов витекса (витексин, кастицин, изоориентин, кемпферол) проявляют обезболивающие и успокаивающие свойства. Экспериментальные исследования показали, что противоболевое действие экстрактов витекса связано с модуляцией активности опиоидных рецепторов. Модуляция опиоидных рецепторов, в частности, способствует эффективности экстрактов витекса в терапии ПМС [40].

В настоящее время различают 4 основные группы опиоидных рецепторов: µ- (мю), δ- (дельта), κ- (каппа) ноцицептивные рецепторы [41]. Эффект анальгезии наблюдается при стимуляции µ-, δ- и κ-рецепторов. Агонисты µ-рецепторов, кроме того, вызывают угнетение дыхания и седативный эффект, а агонисты κ-рецепторов – психотомиметические эффекты [42]. Физиологические роли этих разновидностей опиоидных рецепторов суммированы в табл. 5.

Стандартизированные экстракты Vitex Agnus-castus активируют µ-опиоидные рецепторы. При концентрации экстракта 70 мкг/мл достигалась 50–60% от полной активности рецептора (рис. 9) [40].

Стандартизированные экстракты витекса активируют преимущественно µ- и δ-опиоидные рецепторы, что обеспечивает обезболивающий и антидепрессивный эффекты. В частности кастицин, который используется как маркер стандартизации экстрактов витекса, является селективным агонистом δ-опиоидных рецепторов [43] (рис. 10). Среди эндогенных опиоидных нейротрансмиттеров, эндорфины и эндоморфины проявляют максимальное сродство к рецепторам типа µ, энкефалины – к δ-рецепторам, динорфины – к κ-рецепторам [44]. Поэтому можно предположить, что кастицин в составе экстрактов витекса более близок по своим эффектам именно к эндорфинам, эндоморфинам и энкефалинам [40]. Антиноцицептивный эффект экстрактов витекста связан также и с активацией опиоидных рецепторов флавонового гликозида витексина, также обладающего вазодилаторными, нейропротекторными и противовоспалительными свойствами [45]. Витексин вводили перорально в дозах 10, 20 и 30 мг/кг, что значительно увеличило время реакции животных в болевых тестах. Обезболивающий эффект резко снижался после предварительной обработки опиоидным ан тагонистом (налоксон). В отличие от кастицина, витексин связывается с µ-, δ- и κ-опиоидными рецепторами [45].

Помимо витексина и кастицина, витеагнузины, апигенин, кемпферол и лютеолин в составе Vitex Agnus-castus также обладают сродством к μ- и δ-рецепторам [46]. β-кариофиллен индуцирует обезболивающий эффект при участии каннабиноидных и опиоидных рецепторов. Антиноцицептивный эффект β-кариофиллена тормозился после предварительной обработки селективным антагонистом каннабиоидных рецепторов типа CB2 и селективным антагонистом µ-опиоидных рецепторов. Обезболивающее действие β-кариофиллена опосредовано активацией CB2-рецепторов, который затем стимулирует высвобождение из кератиноцитов эндогенного опиоида β-эндорфина [47].

Активация рецептора определялась с использованием радиоактивной метки на ГТФ. SNC-80, селективный лиганд δ-опиоидных рецепторов.

Противовоспалительный эффект и иммуномодуляция

Избыточный воспалительный ответ со стороны клеток эндотелия нарушает процессы имплантации и часто делает зачатие невозможным. Снижение абнормального повышенного провоспалительного фона является важным компонентом преконцептуальной подготовки.

Большинство из перечисленных в табл. 1–3 компонентов экстрактов Vitex Agnus-castus обладают противовоспалительными свойствами. Это связано не только с антиоксидантными свойства полифенолов, флавоноидов и терпенов [48], но и с непосредственным воздействием компонентов экстрактов витекса на такие фундаментальные механизмы регуляции воспаления как секреция цитокинов и метаболизм простагландинов.

В частности, экстракты витекса предотвращают эозинофильное воспаление за счет снижения секреции эотаксина и, следовательно, интенсивности миграции эозинофилов [49]. Эозинофилия и лимфоцитоз значительно снижаются на фоне снижения уровней провоспалительных цитокинов ИЛ-4, ИЛ-5 и ФНО-α [50]. Компоненты экстрактов также ингибируют циклооксигеназы при цитокин-опосредованном воспалении, значительно снижая отек [51].

Выраженное противовоспалительное действие характерно для всех экстрактов растений рода Vitex – V.Agnus-castus, V.negundo, V.Trifolia, V.Rotundifolia. Например, был показан терапевтический эффект стандартизированного экстракта семян Vitex Negundo на модели экспериментального артрита. Значительно снизились отек, оценка интенсивности проявлений артрита по балльной шкале и абнормальная потеря массы. Гистологические исследования показали заметное снижение синовиальной провоспалительной инфильтрации и синовиальной гиперплазии поверхности суставов (рис. 11) на фоне снижение провоспалительных цитокинов ФНО-α, ИЛ-1β и ИЛ-6 и повышения уровней противовоспалительного ИЛ-10. Отмечено достоверное снижение активности ЦОГ-2 и 5-липоксигеназы – основных ферментов метаболизма простагландинов [52].

Среди компонентов экстрактов Vitex Agnus-castus, артеметин, пендулетин и кастицин непосредственно модулируют метаболизм простагландинов (ингибирование 5-липоксигеназы) [53]. Кастицин также ингибирует хемотаксис нейтрофилов [54]. На метаболизм простагландинов также воздействуют розмариновая кислота (ингибитор циклооксигеназы), мусаенозидовая кислота и кверцетагетин (см. табл. 2).

Антипролиферативный и другие противоопухолевые эффекты экстрактов витекса

Дополнительным преимуществом стандартизированных экстрактов витекса являются противоопухолевые эффекты. Более 20 из перечисленных в табл. 1, 2 и 3 компонентов эктрактов витекса обладают выраженными антипролиферативными и противоопухолевыми свойствами. Способствуя регуляции апоптоза, компоненты экстрактов витекса цитотоксичны для онкотрансформированных клеток.

Действительно, стандартизированные экстракты витекса являются весьма перспективным средством повышения противоопухолевого иммунитета. Например, была установлена цитотоксичность экстрактов Vitex Agnus-castus для клеток рака молочной железы, карциномы желудка (КАТО-III), рака ободочной кишки (COLO 201), рака легкого (Lu-134- AH), промиелолейкоза HL-60 [55], клеток гиперплазии предстательной железы и рака простаты (BPH-1, LNCaP, PC-3) [56] и др. Цитотоксическую активность экстрактов витекса связывают с индукцией апоптоза раковых клеток за счет увеличения внутриклеточного окисления [57].

В частности, экстракт плодов Vitex Agnus-castus дозозависимо индуцирует апоптоз карциномы желудка человека (клеточная линия КАТО-III) через регуляцию внутриклеточного окислительного стресса. При этом фрагментация ДНК при активации процессов апоптоза сопровождается подавлением избыточной активности Mn-супероксиддисмутазы и каталазы, активации каспаз 3, 8, и 9 [58] (рис. 12).

Противоопухолевые свойства проявляют такие характерные для экстрактов витекса соединения, как кастицин, витексины, витетрифолины. Кастицин показал цитотоксическую активность против различных типов клеток опухолей и, в частности, лейкоза (HL-60, U-937) [59], рака печени, рака толстой кишки [60]. Противоопухолевые эффекты кастицина связаны с остановкой роста клеток в фазе деления клетки G2/M и с инициацией апоптоза. Кастицин индуцирует белок р21, который ингибирует циклин-киназу CDK1, тем самым тормозя цикл деления клеток. Кроме того, кастицин регулирует уровни циклина А [61].

Витексин-1 ингибирует рост и ангиогенез опухолей за счет инактивации протеинкиназы В [62]. Витексин-6 индуцирует аутофагию и апоптоз раковых клеток путем дозозависимой активации Jun-киназы [63]. Витетрифолин D индуцирует НАДФ (Н):хинон оксидоредуктазу-1, что важно для химиопрофилактики [13]. Апигенин ингибирует устойчивые к антиэстрогенам линии клеток рака молочной железы [64]. Подчеркнем, что проблемы репродуктивного здоровья женщин в существенной степени ассоциированы со снижением противоопухолевого иммунитета, приводящим к эндометриозу, развитию опухолей молочной железы и яичников.

Заключение

Традиционно прегравидарная подготовка женщины включает санацию очагов хронической инфекции (включая ЗПП) и назначение фолиевой кислоты. Использование стандартизированных фитоэкстрактов является относительно новым и перспективным направлением прегравидарной подготовки.

Стандартизированные экстракты Vitex Agnus-castus используются для облегчения симптомов предменструального синдрома, циклической масталгии, гиперпролактинемии, синдрома поликистозных яичников и для иммуномодуляции. В настоящей работе представлены результаты систематического анализа состава и фармакологических свойств основных компонентов экстрактов витекса. Эти вещества характеризуются противовоспалительным, антипролиферативным, антиоксидантным, противомикробным, сердечно- и вазопротекторным действием. Ряд веществ также характеризуются антикоагулянтными и антиагрегантными, анксиолитическими, ранозаживляющими и антигиперпролактинемическими свойствами. Результаты экспериментальных и клинических исследований стандартизированных экстрактов витекса будут рассмотрены в последующих работах.

Для прегравидарной подготовки женщин с гиперпролактинемией в России зарегистрирован витаминно-минеральный комплекс Прегнотон, обогащенный стандартизированным экстрактом витекса. Препарат выпускается в форме порошка для приготовления напитка. Наряду с экстрактом витекса (40 мг), в состав препарата входят: фолиевая кислота (600 мкг), йод (150 мкг), цинк (12 мг), витамин С (90 мг), витамин Е (15 мг), селен (55 мкг), витамин В2 (1 мг), витамин В6 (2 мг), магний (80 мг) и L-аргинин (915 мг). Компоненты Прегнотона способствуют снижению риска пороков развития и патологии беременности в ранних сроках, обеспечивают профилактику внутриутробной инфекции, позволяют нормализовать менструальный цикл, улучшают состояние эмоциональной сферы.

Литература

1. Vitex agnus-castus. Monograph. Altern Med Rev. 2009;14 (1): 67–71.
2. Tandon S., Mittal A.K., Pant A.K. Insect growth regulatory activity of Vitex trifolia and Vitex agnus-castus essential oils against Spilosoma obliqua. Fitoterapia. 2008;79 (4): 283–6.
3. Sharon R., Soroker V., Wesley S.D. et al. Vitex agnus-castus is a preferred host plant for Hyalesthes obsoletus. J Chem Ecol. 2005; 31 (5): 1051–1063.
4. Rani A., Sharma A. The genus Vitex: A review. Pharmacogn Rev. 2013; 7 (14): 188–98.
5. Lataoui M., Seffen M., Aliakbarian B. et al. Optimisation of phenolics recovery from Vitex agnus-castus Linn. leaves by high-pressure and temperature extraction. Nat Prod Res. 2014; 28 (1): 67–9.
6. Liu Q.Y., Chen Y.S., Wang F. et al. Chemical of Vitex trifolia. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2014; 39 (11): 2024–2028.
7. Sena Filho J.G., Duringer J., Maia G.L. et al. Ecdysteroids from Vitex species: distribution and compilation of their 13C-NMR spectral data. Chem Biodivers. 2008; 5 (5): 707–13.
8. Hogner C., Sturm S., Seger C., Stuppner H. Development and validation of a rapid ultra-high performance liquid chromatography diode array detector method for Vitex agnus-castus. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2013; 927: 181–90.
9. Mari A., Montoro P., D’Urso G. et al. Metabolic profiling of Vitex agnus-castus leaves, fruits and sprouts: Analysis by LC/ESI/(QqQ)MS and (HR) LC/ESI/(Orbitrap)/MS J Pharm Biomed Anal. 2014; 102C: 215–221. Dec; 31(12):1564–8.
10. Kuruuzum-Uz A., Stroch K., Demirezer L.O., Zeeck A. Glucosides from Vitex agnus-castus. Phytochemistry. 2003; 63 (8): 959–964.
11. Ono M., Yamasaki T., Konoshita M. et al. Five new diterpenoids, viteagnusins A–E, from the fruit of Vitex agnus-castus. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2008; 56 (11): 1621–1624.
12. Hirobe C., Qiao Z.S., Takeya K., Itokawa H. Cytotoxic flavonoids from Vitex agnus-castus. Phytochemistry. 1997; 46 (3): 521–524.
13. Li S., Qiu S., Yao P. et al. Compounds from the Fruits of the Popular European Medicinal Plant Vitex agnus-castus in Chemoprevention via NADP(H):Quinone Oxidoreductase Type 1 Induction. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 432829.
14. Marongiu B., Piras A., Porcedda S. et al. Extraction, separation and isolation of volatiles from Vitex agnus-castus L. (Verbenaceae) wild species of Sardinia, Italy, by supercritical CO2. Nat Prod Res. 2010; 24 (6): 569–79.
15. Ghannadi A., Bagherinejad M., Abedi D. et al. Antibacterial activity and composition of essential oils from Pelargonium graveolens L’Her and Vitex agnus-castus L. Iran J Microbiol. 2012; 4 (4): 171–176.
16. Sorensen J.M., Katsiotis S.T. Parameters influencing the yield and composition of the essential oil from Cretan Vitex agnus-castus fruits. Planta Med. 2000; 66 (3): 245–250.
17. Pan J.G., Xu Z.L., Fan J.F. GC-MS analysis of essential oils from four Vitex species. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 1989; 14 (6): 357–9, 383.
18. Wollenweber E., Mann K. Flavonols from Fruits of Vitex agnus-castus. Planta Med. 1983; 48 (2): 126–127.
19. Sirait M., Rimpler H., Haensel R. Flavonoids from Vitex agnus castus L. Experientia. 1962; 18: 72.
20. Li M.M., Su X.Q., Sun J. et al. Anti-inflammatory Ursane- and Oleanane-Type Triterpenoids from Vitex negundo var. cannabifolia. J Nat Prod. 2014; 77 (10): 2248–54.
21. Tiwari N., Thakur J., Saikia D., Gupta M.M. Antitubercular diterpenoids from Vitex trifolia. Phytomedicine. 2013; 20 (7): 605–10.
22. .Rudrapaul P., Sarma I.S., Das N. et al. New flavonol methyl ether from the leaves of Vitex peduncularis exhibits potential inhibitory activity against Leishmania donovani through activation of iNOS expression. Eur J Med Chem. 2014; 87C: 328–335.
23. Kamruzzaman M., Bari S.M., Faruque S.M. In vitro and in vivo bactericidal activity of Vitex negundo leaf extract against diverse multidrug resistant enteric bacterial pathogens. Asian Pac J Trop Med. 2013; 6 (5): 352–9.
24. Jarry H., Spengler B., Porzel A. et al. Evidence for estrogen receptor beta-selective activity of Vitex agnus-castus and isolated flavones. Planta Med. 2003; 69 (10): 945–947.
25. Ibrahim N.A., Shalaby A.S., Farag R.S. et al. Gynecological efficacy and chemical investigation of Vitex agnus-castus L. fruits growing in Egypt. Nat Prod Res. 2008; 22 (6): 537–46.
26. Hu Y., Hou T.T., Zhang Q.Y. et al. Evaluation of the estrogenic activity of the constituents in the fruits of Vitex rotundifolia L. for the potential treatment of premenstrual syndrome. J Pharm Pharmacol. 2007; 59 (9): 1307–1312.
27. Liu J., Burdette J.E., Xu H., Gu C. et al. Evaluation of estrogenic activity of plant extracts for the potential treatment of menopausal symptoms. J Agric Food Chem. 2001; 49 (5): 2472–2479.
28. Van Die M.D., Burger H.G., Teede H.J., Bone K.M. Vitex agnuscastus extracts for female reproductive disorders: a systematic review of clinical trials. Planta Med. 2013; 79 (7): 562–75.
29. Blumenthal M. The ABC Clinical Guide to Herbs. New York, NY: Thieme; 2003:61–72.
30. Carmichael A.R. Can Vitex Agnus Castus be Used for the Treatment of Mastalgia? What is the Current Evidence? Evid Based Complement Alternat Med. 2008; 5 (3): 247–50.
31. Hu Y., Xin H.L., Zhang Q.Y. et al. Anti-nociceptive and anti-hyperprolactinemia activities of Fructus Viticis and its effective fractions and chemical constituents. Phytomedicine. 2007; 14 (10): 668–74 Epub 2007 Ma.
32. Ye Q., Zhang Q.Y., Zheng C.J. et al. Casticin, a flavonoid isolated from Vitex rotundifolia, inhibits prolactin release in vivo and in vitro. Acta Pharmacol Sin. 2010.
33. Azarnia M., Ejtemaei-Mehr S., Shakoor A., Ansari A. Effects of Vitex agnus-castus on mice fetus Development. Acta Med Iran. 2007; 45: 264–70.
34. Park S.E., Sapkota K., Choi J.H. et al. Rutin from Dendropanax morbifera Leveille protects human dopaminergic cells against rotenone induced cell injury through inhibiting JNK and p38 MAPK signaling. Neurochem Res. 2014; 39 (4): 707–18.
35. Shen W., Qi R., Zhang J. et al. Chlorogenic acid inhibits LPS-induced microglial activation and improves survival of dopaminergic neurons. Brain Res Bull. 2012; 88 (5): 487–94.
36. Chen H.Q., Jin Z.Y., Wang X.J. et al. Luteolin protects dopaminergic neurons from inflammation-induced injury through inhibition of microglial activation. Neurosci Lett. 2008; 448 (2): 175–9.
37. Wang J., Xu H., Jiang H. et al. Neurorescue effect of rosmarinic acid on 6-hydroxydopamine-lesioned nigral dopamine neurons in rat model of Parkinson’s disease. J Mol Neurosci. 2012; 47 (1): 113–9.
38. Meier B., Berger D., Hoberg E. et al. Pharmacological activities of Vitex agnus-castus extracts in vitro. Phytomedicine. 2000; 7 (5): 373–381.
39. Nasri S., Oryan S., Rohani A.H., Amin G.R. The effects of Vitex agnus-castus extract and its interaction with dopaminergic system on LH and testosterone in male mice. Pak J Biol Sci. 2007; 10 (14): 2300–2307.
40. Webster D.E., Lu J., Chen S.N. et al. Activation of the mu-opiate receptor by Vitex agnus-castus methanol extracts: implication for its use in PMS. J Ethnopharmacol. 2006; 106 (2): 216–21 Epub 2006 Ja.
41. Dhawan B.N., Cesselin F., Raghubir R. et al. International Union of Pharmacology. XII. Classification of opioid receptors. Pharmacol Rev. 1996; 48 (4): 567–592.
42. Janecka A., Fichna J., Janecki T. Opioid receptors and their ligands. Curr Top Med Chem. 2004; 4 (1): 1–17.
43. Webster D.E., He Y., Chen S.N. et al. Opioidergic mechanisms underlying the actions of Vitex agnus-castus L. Biochem Pharmacol. 2011; 81 (1): 170–7.
44. Katzung B. Basic & clinical pharmacology. 10th edition. McGrawHill Medical. 2007; 489–490:1200: ISBN 0071604057.
45. Demir Ozkay U., Can O.D. Anti-nociceptive effect of vitexin mediated by the opioid system in mice. Pharmacol Biochem Behav. 2013; 109: 23–30.
46. Chen S.N., Friesen J.B., Webster D. et al. Phytoconstituents from Vitex agnus-castus fruits. Fitoterapia. 2011; 82 (4): 528–33.
47. Katsuyama S., Mizoguchi H., Kuwahata H. et al. Involvement of peripheral cannabinoid and opioid receptors in beta-caryophyllene-induced antinociception. Eur J Pain. 2013; 17 (5): 664–75.
48. Макарова М.Н., Макаров В.Г. Молекулярная биология флавоноидов. СПб.: Лема, 2010; 438.
49. Sohn S.H., Ko E., Oh B.G. et al. Inhibition effects of Vitex rotundifolia on inflammatory gene expression in A549 human epithelial cells. Ann Allergy Asthma Immunol. 2009; 103 (2): 152–9.
50. Bae H., Kim Y., Lee E. et al. Vitex rotundifolia L. prevented airway eosinophilic inflammation and airway remodeling in an ovalbumin-induced asthma mouse model. Int Immunol. 2013; 25 (3): 197–205.
51. Chattopadhyay P., Hazarika S., Dhiman S. et al. Vitex negundo inhibits cyclooxygenase-2 inflammatory cytokine-mediated inflammation on carrageenan-induced rat hind paw edema. Pharmacognosy Res. 2012; 4 (3): 134–7.
52. Zheng C.J., Zhao X.X., Ai H.W. et al. Therapeutic effects of standardized Vitex negundo seeds extract on complete Freund’s adjuvant induced arthritis in rats. Phytomedicine. 2014; 21 (6): 838–46.
53. Choudhary M.I., Jalil S., Nawaz S.A. et al. Antiinflammatory and lipoxygenase inhibitory compounds from Vitex agnus-castus. Phytother Res. 2009; 23 (9): 1336–9.
54. Mesaik M.A., Murad S., Khan K.M. et al. Isolation and immunomodulatory properties of a flavonoid, casticin from Vitex agnus-castus. Phytother Res. 2009; 23 (11): 1516–20.
55. Kikuchi H., Yuan B., Yuhara E. et al. Involvement of histone H3 phosphorylation via the activation of p38 MAPK pathway and intracellular redox status in cytotoxicity of HL-60 cells induced by Vitex agnus-castus fruit extract. Int J Oncol. 2014; 45 (2): 843–52.
56. Weisskopf M., Schaffner W., Jundt G. et al. A Vitex agnus-castus extract inhibits cell growth and induces apoptosis in prostate epithelial cell lines. Planta Med. 2005; 71 (10): 910–916.
57. Ohyama K., Akaike T., Hirobe C., Yamakawa T. Cytotoxicity and apoptotic inducibility of Vitex agnus-castus fruit extract in cultured human normal and cancer cells and effect on growth. Biol Pharm Bull. 2003; 26 (1): 10–18.
58. Ohyama K., Akaike T., Imai M. et al. Human gastric signet ring carcinoma (KATO-III) cell apoptosis induced by Vitex agnus-castus fruit extract through intracellular oxidative stress. Int J Biochem Cell Biol. 2005; 37 (7): 1496–1510.
59. Kikuchi H., Yuan B., Nishimura Y. et al. Cytotoxicity of Vitex agnuscastus fruit extract and its major component, casticin, correlates with differentiation status in leukemia cell lines. Int J Oncol. 2013; 43 (6): 1976–84.
60. Qu L., Liu F.X., Cao X.C. et al. Activation of the apoptosis signalregulating kinase 1/c-Jun N-terminal kinase pathway is involved in the casticin-induced apoptosis of colon cancer cells. Exp Ther Med. 2014; 8 (5): 1494–1500 Epub 2014.
61. Haidara K., Zamir L., Shi Q.W., Batist G. The flavonoid Casticin has multiple mechanisms of tumor cytotoxicity action. Cancer Lett. 2006; 242 (2): 180–90 Epub 2006 Ja.
62. Wang J., Zheng X., Zeng G. et al. Purified vitexin compound 1 inhibits growth and angiogenesis through activation of FOXO3a by inactivation of Akt in hepatocellular carcinoma. Int J Mol Med. 2014; 33 (2): 441–8.
63. Zhou J., Hu H., Long J. et al. Vitexin 6, a novel lignan, induces autophagy and apoptosis by activating the Jun N-terminal kinase pathway. Anticancer Drugs. 2013; 24 (9): 928–36.
64. Long X., Fan M., Bigsby R.M., Nephew K.P. Apigenin inhibits antiestrogen-resistant breast cancer cell growth through estrogen receptor-alpha-dependent and estrogen receptor-alpha-independent mechanisms. Mol Cancer Ther. 2008; 7 (7): 2096–108.

Авторы: Бурчаков Д.И.¹, Ших Е.В.^2
1 НОЧУ ДПО «Высшая медицинская школа», Москва, Российская Федерация
² Институт профессионального образования, ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет) Минздрава России, Москва, Российская Федерация

Резюме. Витекс священный используют в медицине уже две тысячи лет, но только в XX веке нам стали открываться нейрофизиологические механизмы его действия. В данном нарративном обзоре представлена краткая история медицинского применения витекса священного и его многообразных благотворных клинических эффектов. Далее рассматривается устройство центрального дофаминергического ответа на стресс, который можно смягчить с помощью лекарс …

Нормализация цикла: когда поможет витекс?

С нарушениями менструального цикла приходится сталкиваться многим женщинам. Причины отклонений от нормы могут быть разными, но механизм один: сдвиг гормонального баланса.

В регуляции цикла участвует несколько видов гормонов. Причем важно не только их количество, но соотношение друг с другом. Ученые признают, что чаще всего цикл нарушается из-за избыточной выработки гормона пролактина. Такое состояние называют гиперпролактинемией.

Как понять, что в организме слишком много пролактина?

Пролактин отвечает за выработку молока во время кормления грудью. Однако у него есть и другие функции. Пролактин замедляет выработку фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и тормозит процесс овуляции, иногда может предотвращать менструации в период кормления. Этот физиологический механизм нужен, чтобы снизить вероятность беременности следующим ребенком во время кормления грудью.

Однако высокий уровень пролактина у некормящей женщины вызовет удлинение лютеиновой фазы цикла (промежуток времени между овуляцией и началом менструального кровотечения), уменьшит выработку эстрогенов фолликулами яичников и секрецию прогестерона желтым телом. В результате нарушится естественное течение цикла.

Повышенный пролактин приводит к следующим сбоям в цикле:

• слишком длинный цикл (более 35 дней),
• скудные выделения,
• отсутствие овуляции во время цикла.

Причины высокого пролактина у небеременных

Во время беременности и после родов повышенная выработка пролактина – естественный процесс. Но почему повышается пролактин у небеременных женщин?

• Высокий уровень эстрогенов. Пролактин тормозит выработку эстрогенов, поэтому организм, вырабатывая больше пролактина, пытается нормализовать гормональный баланс.
• Новообразования в гипофизе, при которых увеличивается количество клеток, вырабатывающих пролактин.
• Стрессовые состояния, тревога, депрессия, психозы.
• Сильная боль (например, после травмы или операции) – это связано с тем, что пролактин обладает обезболивающими свойствами.
• Прием противозачаточных средств, некоторых лекарств (антипсихотики, транквилизаторы, антидепрессанты, противорвотные).
• Заболевания: гипотиреоз, нарушения функции яичников, нарушения работы гипоталамуса, цирроз печени, аутоиммунные заболевания.

Кроме того, существует идиопатическая гиперпролактинемия: количество клеток, вырабатывающих пролактин, не увеличивается, но зато возрастает их активность. Причины такого явления неизвестны. Установить их сложно еще и потому, что пролактин вырабатывается в гипофизе, но регулирует выработку гормона гипоталамус. А изучать работу человеческого мозга очень сложно.

Как нормализовать цикл при высоком уровне пролактина?

Для восстановления нормального цикла при умеренной гиперпролактинемии не используют гормональные средства, потому что есть более безопасные варианты уменьшить выработку пролактина. Эффективным считается прием витекса. Это древовидный кустарник, который давно используется в народной медицине при «женских проблемах».

Витекс «работает» по двум направлениям:

1. Воздействует на эстрогеновые рецепторы, повышая их чувствительность. Это приводит к тому, что эстрогены поступают в клетки, а их концентрация в крови снижается. Организму больше не надо вырабатывать «лишний» пролактин, чтобы уменьшить уровень эстрогенов.

2. Не позволяет клеткам гипофиза высвобождать пролактин, если в крови его уже достаточно. При этом содержащееся в витексе вещество кастицин как бы программирует клетки гипофиза на производство нормальных, а не повышенных объемов пролактина.

В случае нормальной выработки пролактина или эстрогенов экстракт витекса не будет вызывать их изменения. Это значит, что нет опасности «перестараться» со снижением уровня пролактина и вызвать его нехватку.

Дополнительные плюсы приема витекса

Витекс делает естественные цикличные изменения гормонального фона более плавными, за счет чего неприятные симптомы предменструального синдрома становятся менее выраженными. Уменьшаются болевые ощущения в области таза и молочных желез, отеки груди. Кроме того, экстракт витекса содержит вещества, которые влияют на дофаминовые рецепторы, что позволяет уменьшить раздражительность, агрессивность и повышенную эмоциональность во время ПМС.

Прегнотон – источник экстракта витекса

Экстракт витекса можно найти в составе различных комплексов, ориентированных на поддержку женского здоровья. Особенно стоит выделить Прегнотон. Он содержит не только экстракт витекса, но и витамины с минералами, которые играют важную роль в правильной работе женской репродуктивной системы (например, йод, витамин Е, фолиевая кислота).

Очень важно, что клинические исследования подтвердили эффективность Прегнотона для нормализации уровня пролактина, в том числе и когда причина повышенного пролактина не была установлена.

Еще один плюс Прегнотона – форма приема. Прегнотон выпускается в виде порошка в порционных саше, после растворения порошка в стакане воды получается напиток с приятным вкусом. Чем же это хорошо? Жидкая форма обеспечивает высокую биодоступность и усвоение полезных веществ, а также позволяет свести к минимуму количество вспомогательных веществ, что в свою очередь снижает риск аллергии.

НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕКЛАМОЙ. МАТЕРИАЛ ПОДГОТОВЛЕН ПРИ УЧАСТИИ ЭКСПЕРТОВ.