Фитокост new инструкция по применению

Восстановление костной и хрящевой тканей в экспериментальной модели остеопороза под действием новой экономичной фитотерапевтической композиции (Фитокост New)

Волков Е.Е.¹, Корсун В.Ф. ⁴, Извольская М.С.² Василенко А.М.³

¹ООО Медицинский центр ХуанДи, Москва, Россия; ²ФГБУН Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, Москва, Россия. ³ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр реабилитации и курортологии МЗ РФ, ⁴ФГАОУВО «Российский университет дружбы народов»

 The recovery of bone and cartilage in an experimental model of osteoporosis under the action of a new cost-effective phytotherapeutic composition (Fitokost New)

Volkov EE, Korsun VF, Izvolskaia MS, Vasilenko AM

Резюме.

Актуальность проблемы определяется широкой распространённостью остеопороза, недостаточной эффективностью и ятрогенными эффектами лекарственной терапии. На фоне множества разнообразных рецептов фитотерапии из области народной медицины научные данные об её применении при остеопорозе малочисленны и представлены в основном зарубежными исследователями. Ранее нами было показано, что многокомпонентный отечественный фитопрепарат Фитокост корригирует нарушения в хрящевой и костной тканях, вызванные преднизолоном в экспериментальной модели остеопороза.

Цель исследования: определить эффективность новой более экономичной фитокомпозиции «Фитокост New» на течение экспериментального остеопороза.

Материалы и методы. Эксперименты были проведены на 3-месячных мышах линии Balb/c на модели остеопороза. Животные были разделены на 6 групп: 1 – контрольная группа – интактные животные. Животным 2-6 групп ежедневно внутримышечно вводили преднизолон (1,0 мг/мышь) в течение 14 суток. Животных 2-ой группы забивали по окончании последней инъекции преднизолона. Животные 3-ей группы не получали фитопрепарат в течение 30 суток. Животные 4-ой группы получали ежедневно перорально ранее полученный фитопрепарат Фитокост (50 мг/мышь) в течение 30 суток. Животные 5 и 6 групп получали новую фитокомпозицию Фитокост New в дозах 50 и 5 мг/мышь, соответственно, в течение 30 суток.

Результаты. Выявлен дозо-зависимый репаративный эффект Фитокоста New в виде снижения числа хондробластов и восстановления костной ткани подобно препарату Фитокост.

Заключение. Эффективность Фитокоста New, отличающегося существенно меньшим числом компонентов, по сравнению с ранее полученным препаратом Фитокост, не уступает ему по своей активности в восстановлении хрящевой и костной тканей в модели остеопороза.

Ключевые слова: остеопороз, преднизолон, Фитокост New, хрящевая и костная ткани.

Abstract

Background. The urgency of the problem is determined by the wide prevalence of osteoporosis, insufficient efficiency and iatrogenic effects of drug therapy. Against the background of many different recipes of herbal medicine from the field of traditional medicine, scientific data on its use in osteoporosis are scarce and presented mainly by foreign researchers. Previously we have shown that multi-component domestic phytopreparation Fitokost corrigiruet disturbances in cartilage and bone tissues caused by prednisone in experimental models of osteoporosis. The purpose of the study was to determine the effectiveness of a new, more efficient creation of phyto compositions «Fitokost New» on the course of experimental osteoporosis. Materials and methods. The experiments were carried out on 3-month mice of Balb/c line on osteoporosis model. The animals were divided into 6 groups: 1 – control group – intact animals. Animals of groups 2-6 were administered daily intramuscular injection of prednisolone (1.0 mg/mouse) for 14 days. Animals of the 2nd group were slaughtered at the end of the last injection of prednisolone. Animals of the 3rd group did not receive phytopreparation within 30 days. Animals of the 4th group received daily oral previously obtained phytopreparation Fitokost (50 mg/mouse) for 30 days. Animals 5 and 6 groups received new fitokompozitsiya the New Fitokost in doses of 50 and 5 mg/mouse, respectively, for 30 days. Results. Revealed dose-dependent reparative effect Fitokost New reduction in the number of chondroblasts and bone regeneration like a drug Fitokost. Conclusion. The effectiveness of the New Fitokost, which have significantly fewer components, compared to previously obtained drug Fitokost, not inferior to him in their activity in the regeneration of cartilage and bone tissue in a model of osteoporosis.

Key words: osteoporosis, prednisone, Fitokost New, cartilage and bone tissue

Введение. Растущая распространенность, недостаточно эффективные методы лечения, персональное и общественное социально-экономическое бремя остеопороза [1-3] обусловливают необходимость поиска новых и совершенствование уже известных подходов к его профилактике и лечению [4-6]. Однако оптимистические ожидания, связанные с широким внедрением в практику множества современных фармацевтических средств для его лечения, оправдываются не в полной мере. Это обусловлено высоким уровнем лекарственных ятрогений [5], высокой ценой и недостаточной эффективностью препаратов. Поэтому поиск комплементарных подходов к коррекции нарушений, наблюдаемых при остеопорозе, в том числе, в арсенале натуропатических средств, остаётся актуальным.

В связи с лекарственными ятрогениями стал возрождаться интерес к фитотерапии (ФТ), которая признаётся одним из наиболее безопасных методов лечения острых и хронических заболеваний, при условии, что лечением занимается специалист, а не сам пациент. Однако данные по научному обоснованию и практике применения ФТ при остеопорозе в настоящее время наиболее широко представлены в зарубежной, и в первую очередь, китайской литературе [7-15] и в меньшей степени отечественными исследователями [16, 17]. Среди нескольких запатентованных отечественных ФТ композиций, предназначенных для лечения и профилактики остеопороза [18 19], оценка их эффективности проведена лишь для одной композиции [20], получившей название «Фитокост». В состав этой композиции включены компоненты более чем из 60 лекарственных растений, оказывающих наиболее выраженное действие на отдельные звенья патогенеза остеопороза.

На модели остеопороза, индуцированного у мышей введением преднизолона, было показано, что композиция Фитокост вызывает восстановление костной и хрящевой тканей тазобедренных суставов животных [21]. Более выраженный эффект наблюдался под действием фитокоста с циклодекстрином [22]. Исследованные отечественные фитокомпозиции отличаются от ряда зарубежных аналогов существенно бóльшим числом входящих в нее компонентов. Многокомпонентность Фитокоста обусловлена широким спектром патогенетических механизмов остеопороза и стремлением к их тотальному перекрытию. Такой подход целесообразен при полиэтиологичном остеопорозе, но может рассматриваться и как полипрагмазия в иных ситуациях. Целевые установки при разработке любых лечебных средств наряду с обеспечением их эффективности и безопасности должны включать также ценовую доступность для широких слоев населения. Исходя из этого, нами была разработана новая ФТ композиция для лечения остеопороза «Фитокост New», содержащая 20 компонентов.

Цель работы: исследование влияния новой фитокомпозиции Фитокост New на восстановление хрящевой и костной тканей в экспериментальной модели остеопороза.

Материалы и методы

Композицию Фитокост New получали экстрагированием 20 фитокомпонентов ранее описанным способом [20]. В ее состав входят такие вещества, как плоды софоры кавказской, трава астрагала шерстистоцветкового, корни сабельника болотного, корни одуванчика обыкновенного, корни окопника лекарственного, трава горца птичьего, трава зюзника европейского, корневища бадана толстолистного, кора осины серой, слоевище исландского мха, листья крапивы двудомной, трава лабазника вязолистного, листья шалфея лекарственного, цветки календулы лекарственной, кукурузные рыльца, гриб чага, листья мелиссы лекарственной, трава маклеи сердцевидной, корни солодки голой, дигидрокверцетин с арабиногалактаном (6-10%). Дигидрокверцетин – биофлавоноид, получаемый из комлевой части лиственницы сибирской, активный антиоксидант, обладающий, противовоспалительным, обезболивающим и иммуномодулирующим действием. Арабиногалактан – полисахарид, также получаемый из древесины лиственницы, используется для повышения всасываемости лекарственных средств, характеризующихся низкой биодоступностью. Обладает антиоксидантым и противовоспалительным действием, способствует восстановлению структуры соединительной ткани [23].

Согласно протоколу испытаний №19066.05.03 от 13.07.2018 г. Фитокост New соответствует техническим регламентам Таможенного союза ТР ТС 022/2011; ТР ТС 029/2012; ТРТС 021/2011. Регистрационный номер декларации о соответствии: ЕАЭС № RU Д-RU.НА30.В.03475. Дата регистрации декларации о соответствии: 02.08.2018.

Эксперименты были проведены на мышах линии Balb/c, самках 3-месячного возраста, массой 20-23 г (питомник Столбовая РАН). Мышей содержали в стандартных условиях по 5 особей в клетке с контролируемыми режимами температуры (24^o C) и освещения (в течение 12 ч) и со свободным доступом к воде и пище. Для моделирования остеопороза мышам ежедневно внутримышечно (в/м) вводили преднизолон в дозе 1,0 мг/мышь в течение 14 дней. Доза вводимого преднизолона была выбрана на основе полученных нами ранее данных [21].

Все животные были распределены на 6 групп по 10 особей в каждой: 1 группа контрольная –– интактные животные. Животным 2-6 групп ежедневно вводили преднизолон в течение 14 суток. Животных 2-ой группы забивали на 14 сутки после последней инъекции преднизолона. Животные 3-ей группы не получали фитопрепарат в течение 30 суток. Животные 2 и 3 групп служили группами сравнения. Животные 4-ой группы получали ежедневно перорально ранее полученный фитопрепарат Фитокост в активной дозе 50 мг/мышь в течение 30 суток. Животные 5 и 6 групп получали Фитокост New в дозах 50 и 5 мг/мышь, соответственно, в течение 30 суток.

Мышей забивали с помощью цервикальной дислокации, извлекали бедренные кости. Кости фиксировали в 10% формалине, приготовленном на фосфатно-солевом буфере (0,02М, рН7.6) 24 ч при комнатной температуре. Декальцинировали в 5% трихлоруксусной кислоте 24-48 часов. Промывали в фосфатно-солевом буфере (0,02М, рН7.6) и замораживали в изопентане при -40⁰ С. Далее приготавливали срезы толщиной 10µm на криостате Leyca (Германия). Срезы высушивали при комнатной температуре 1 час и окрашивали гематоксилином и эозином. Гематоксилином -5сек, дифференцировали в проточной воде 10 мин, эозином – 15 сек, промывали в дистиллированной воде, высушивали, просветляли в ксилоле и заключали при помощи синтетической смолы. Анализ препаратов проводили на микроскопе Olympus Vanox AH BT3 (Германия) увеличение (х 100) и (х 40). Изображения фотографировали и в поле зрения проводили морфологический анализ клеток. Для определения достоверности различий между опытными и контрольными группами животных использовали непараметрический двусторонний критерий Манна-Уитни (U-тест).

Результаты и обсуждение.

После 14-дневного введения мышам преднизолона в головке бедренной кости мышей наблюдалось значительное увеличение пролиферации хондробластов (рис. 1Б), сохраняющееся и на 30 сут (рис.1В), по сравнению с контрольной группой животных, не получавших инъекции преднизолона (рис.1А). После ежедневного приема фитокомпозиции Фитокост New в течение 30 сут в дозе 50 мг/мышь наблюдалось восстановление клеточного состава гиалинового хряща до своего прежнего состояния, подобно эффекту композиции Фитокост, вводимого в той же дозе (рис 1Г, Д). При этом в поле зрения снижалось число хондробластов до контрольного уровня (группа 1) и начинало увеличиваться число хондроцитов (таблица). После приема Фитокост New в дозе 5 мг/мышь количество хондробластов также достоверно снижалось, но в меньшей степени, чем при дозе 50 мг/мышь (рис. 1 Е).

В группе животных, не получавших фитокомпозицию (3-я группа), через 30 сут в костной ткани были выявлены нарушения ее целостности и хаотичная ориентация коллагеновых волокон (рис. 2В), а также изменения клеточного состава по сравнению с 1-ой контрольной группой (таблица). После приема фитопрепаратов в дозе 50 мг/мышь (группы 4, 5) структура костной ткани практически восстанавливалась до контрольного уровня (рис. 2А, Г, Д). Кроме того, в костной ткани животных, принимавших фитопрепараты, наблюдалось снижение числа остеобластов и увеличение числа остеоцитов по сравнению с группой сравнения 3 (таблица). После приема Фитокост New в дозе 5 мг/мышь также полностью исчезали разрывы костной ткани (рис. 2Е) и изменялся клеточный состав подобно эффекту препарата в высокой дозе, хотя и менее выраженному (таблица). Снижение числа хондробластов в хрящевой ткани и увеличение остеоцитов в костной ткани под действием Фитокост New в дозе 5 мг/мышь свидетельствуют о положительном эффекте этой дозы, который полностью проявится, по-видимому, в более поздние сроки. Следует отметить также, что внешний вид и поведение животных, получавших фитопрепарат выгодно отличались от не принимавших особей.

Заключение. Новая экономичная фитокомпозиция Фитокост New обеспечивает высокую эффективность восстановления хрящевой и костной тканей в экспериментальной модели остеопороза. Уменьшение числа компонентов представленной композиции обусловливает снижение себестоимости его производства.

Таблица. Влияние фитокомпозиций Фитокост и Фитокост New на клеточный состав хрящевой и костной тканей.

Примечание: достоверность различия между опытными и контрольными группами: M±SEM; * р < 0,05  по сравнению с группами 2 и 3; ** р < 0,05 по сравнению со 2 группой; n – количество животных в каждой группе.

Рис. 1. Гистологическое исследование влияния фитопрепаратов Фитокост и Фитокост New на хрящевую ткань головки тазобедренного сустава мышей в модели остеопороза, индуцированного преднизолоном. (А) – интактные; (Б) – после в/м введения преднизолона в дозе 1 мг/мышь через 14 и (В) 30 сут; (Г) – после ежедневного перорального применения фитокомпозиции Фитокост в дозе 50,0 мг/мышь в течение 30 сут; (Д) — после ежедневного перорального применения в течение 30 сут фитокомпозиции Фитокост New в дозе 50,0 мг/мышь и (Е) в дозе 5,0 мг/мышь. Окраска гемотоксилин-эозином. Анализ препаратов проводили на микроскопе Olympus Vanox AH BT3 (Германия), увеличение (х 100) и (х 40).

Рис. 2. Гистологическое исследование влияния фитопрепаратов Фитокост и Фитокост New на бедренную костную ткань мышей в модели остеопороза, индуцированного преднизолоном.

(А) – интактные; (Б) – после в/м введения преднизолона в дозе 1 мг/мышь через 14 и (В) 30 сут; (Г) – после ежедневного перорального применения фитокомпозиции Фитокост в дозе 50,0 мг/мышь в течение 30 сут; (Д) — после ежедневного перорального применения в течение 30 сут фитокомпозиции Фитокост New в дозе 50,0 мг/мышь и (Е) в дозе 5,0 мг/мышь. Окраска гемотоксилин-эозином. Анализ препаратов проводили на микроскопе Olympus Vanox AH BT3 (Германия), увеличение (х 100) и (х 40).

Литература

1. Reginster JY, Burlet N. Osteoporosis: a still increasing prevalence. Bone. 2006;38(2 Suppl 1):S4-S9. https://doi.org/10.1016/j.bone.2005.11.024

2. Лесняк О.М. Аудит состояния проблемы остеопороза в странах восточной Европы и центральной Азии 2010. Остеопороз и остеопатии. 2011;2;3-6. [Lesnyak OM. Audit sostoyaniya problem osteoporoza v stranah vostochnoj Evropy i centralnoj Azii-2010. Osteoporosis and osteopathy. 2011;(2):3-6. (In Russ.)].

3. Мазуров В.И. Остеопороз. Эпидемиология. URL: https://medbe.ru/materials/osteokhondropatii-i-osteoartrozy/osteoporoz-epidemiologiya/ [Mazurov VI Osteoporosis. Epidemiology (In Russ.)].

4. Руденко Э.В., Буглова А.Е., Руденко Е.В., Самоховец О.Ю. Медикаментозное лечение остеопороза у взрослых. Учебно-методическое пособие, Минск: БелМАПО, 2011— 22 с. [Rudenko E V Buglova A E Rudenko E V Samokhovets O IU Medikamentoznoe lechenie osteoporoza u vzroslykh Uchebno-metodicheskoe posobie Minsk BelMAPO 2011 22 s (In Russ.)].

5. Михайлов Е.Е., Беневоленская Л.И. В кн.: Руководство по остеопорозу. Под ред. Л.И. Беневоленской. М: БИНОМ 2003;10—55. [Mikhailov E E Benevolenskaia L I V kn Rukovodstvo po osteoporozu Pod red L I Benevolenskoi M BINOM 2003 10 55 (In Russ.)].

6. Остеопороз (Серия «Клинические рекомендации»)/ под ред. О.М. Лесняк, Л.И. Беневоленской. 2-е изд., перераб. и доп. – М.: ГЭОТАР–Медиа, 2010. – 272 с. [Osteoporoz Seriia Klinicheskie rekomendatsii pod red O M Lesniak L I Benevolenskoi 2-e izd pererab i dop M GEOTAR Media 2010 272 s. (In Russ.)].

7. Setchell KD, Lydeking-Olsen E. Dietary phytoestrogens and their effect on bone: Evidence from in vitro and in vivo, human observational, and dietary intervention studies. Am J Clin Nutr. 2003;78(3 Suppl):593S–609S.

8. Xu M, Qi C, Deng B, Deng PX, Mo CW. Phytotherapy versus hormonal therapy for postmenopausal bone loss: A meta-analysis. Osteoporos Int. 2009;20:519–26.

9. Leung PC, Ko EC, Siu WS. Developing an effective food supplement for the prevention of osteoporosis functional foods. Health Dis. 2011;9:379–88.

10.  Cheng M, Wang Q, Fan Y, Liu X, Wang L, Xie R, Ho CC, Sun W. A traditional Chinese herbal preparation, Er-Zhi-Wan, prevent ovariectomy-induced osteoporosis in rats. J Ethnopharmacol. 2011 Nov 18;138(2):279-85. doi: 10.1016/j.jep.2011.09.030

11. Leung PC, Ko EC, Siu WS. Developing an effective health supplement for the prevention of Osteoporosis. Int J Osteoporosis Metab Disord. 2012;5:1–12.

12. Gao Z, Lu Y, Halmurat Upur, Jing J, Xu D. Study of osteoporosis treatment principles used historically by ancient physicians in Chinese Medicine. Chin J Integr Med. 2013 Nov;19(11):862-8. doi: 10.1007/s11655-013-1328-z.

13. Siu WS, Wong HL, Lau CP, Shum WT, Wong CW, Gao S, Fung KP, Lau CB, Hung LK, Ko CH, Leung PC. The effects of an antiosteoporosis herbal formula containing epimedii herba, ligustri lucidi fructus and psoraleae fructus on density and structure of rat long bones under tail-suspension, and its mechanisms of action. Phytother Res. 2013 Apr;27(4):484-92. doi: 10.1002/ptr.4743.

14. Shu B, Shi Q, Wang YJ. Shen (Kidney)-tonifying principle for primary osteoporosis: to treat both the disease and the Chinese medicine syndrome. Chin J Integr Med. 2015 Sep;21(9):656-61. doi: 10.1007/s11655-015-2306-z.

15. Zhang LL, Tian K, Tang ZH, Chen XJ, Bian ZX, Wang YT, Lu JJ. Phytochemistry and Pharmacology of Carthamus tinctorius L. Am J Chin Med. 2016; 44(2):197-226. doi: 10.1142/S0192415X16500130.

16. Гордеев М.В., Галимов Ш.Н., Фархутдинов Р.Г. Использование лекарственных растений в лечении и профилактике остеопороза. Уфа: «Травы Башкирии», 2007. 26 с. [Gordeev M V Galimov SH N Farkhutdinov R G Ispolzovanie lekarstvennykh rastenii v lechenii i profilaktike osteoporoza Ufa Travy Bashkirii 2007 26 s (In Russ.)].

17. Корсун В.Ф., Волков Е.Е., Ферубко Е.В., Корсун Е.В., Волков А.Е., Ивашкевич М.В. Лекарственные растения в лечении остеопороза, остеоартроза и остеонекроза. Монография. 2017. М. 528 с [Korsun V F Volkov E E Ferubko E V Korsun E V Volkov A E Ivashkevich M V Lekarstvennye rasteniia v lechenii osteoporoza osteoartroza i osteonekroza Monografiia 2017 M 528 s. (In Russ.)].

18.  Трифонов В.Н., Елистратова Ю.А., Елистратов К.Г., Курусь Н.В., Хомякова И.В., Елистратова Т.В. Композиция для лечения и предупреждения остеоартрита, остеопороза и остеоартроза суставов. Патент РФ № 2521227. заявка: 2013-03-28, публикация патента: 27.06.2014. [Trifonov V N Elistratova IU A Elistratov K G Kurus N V KHomiakova I V Elistratova T V Kompozitsiia dlia lecheniia i preduprezhdeniia osteoartrita osteoporoza i osteoartroza sustavov Patent RF 2521227 zaiavka 2013-03-28 publikatsiia patenta 27 06 2014 (In Russ.)].

19.  Сайфутдинова Р.Г., Егоров В.В. http://www.findpatent.ru/patent/233/2338551.html [Saifutdinova R G Egorov V V http www findpatent ru patent 233 2338551 html (In Russ.)].

20.  Гордеева Ю.М., Гордеев М.В., Волков Е.Е. Композиция для восстановления хрящевой и костной ткани при остеопорозе http://www.findpatent.ru/patent/258/2585108.html. [Gordeeva IU M Gordeev M V Volkov E E Kompozitsiia dlia vosstanovleniia khriashchevoi i kostnoi tkani pri osteoporoze http www findpatent ru patent 258 2585108 html (In Russ.)].

Gordeev M V Galimov SH N Farkhutdinov R G Ispolzovanie lekarstvennykh rastenii v lechenii i profilaktike osteoporoza Ufa Travy Bashkirii 2007 26 s

21. Волков Е.Е., Извольская М.С., Воронова С.Н., Василенко А.М., Волков А.Е. Новая фитотерапевтическая композиция для восстановления костной и хрящевой тканей. Экспериментальное исследование. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2015. — Т.59. — №4. — C.30-34. [Volkov EE, Izvolskaia MS, Voronova SN, et al New phytotherapeutic composition for restoring bone and cartilage. Experimental study. Patologicheskaia fiziologiia i eksperimentalnaia terapiia. 2015;59(4):30-34. (in Russ).]

22. Гордеев М.В., Волков Е.Е., Извольская М.С., Воронова С.Н., Василенко А.М. Экспериментальное исследование протективного влияния экстракта фитотерапевтической композиции с циклодекстрином на развитие остеопороза. Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. 2017. Т.94, № 5: 18-24. [Gordeev M V Volkov E E Izvolskaia M S Voronova S N Vasilenko A M New phytotherapeutic composition for restoring bone and cartilage. Experimental study. Problems of Balneology, Physiotherapy and Exercise Therapy 2017 V. 94 №5: 18-242 (in Russ).]

23. Бабкин В.А. Теоретические основы и практические разработки новых препаратов для медицины на основе экстрактивных веществ биомассы лиственницы. Химия растительного сырья. 2014. №3: 111-119. [Babkin V A Theoretical and practical development of new drugs for medicine based extractives larch biomass KHimiia rastitelnogo syria 2014 3 111-119 (in Russ).]

Остеопороз (ОП) занимает одно из ведущих мест среди хронических неинфекционных заболеваний, приводя к высокой инвалидизации и смертности во второй половине жизни. Наличие осложнений ОП в виде переломов костей существенно снижают качество жизни пациентов, что выражается в ухудшении возможности перемещения, а также самообслуживания. Это осложняет жизнь не только самих больных, но и членов их семей и в конечном счете общества в целом. По данным на 2006 г., ОП страдают 200 млн человек по всему миру, а связанные с ним ежегодные расходы превышают 10 млрд долларов [1]. Каждые 3 с в мире происходит один остеопоротический перелом, а, начиная с возраста 50 лет, каждая вторая женщина и каждый пятый мужчина в течение оставшейся жизни будут иметь перелом кости. В группе женщин старше 45 лет общее число койко-дней в связи с ОП превышает таковое при диабете, инфаркте миокарда и раке молочной железы. Согласно подсчетам, в Российской Федерации 14 млн человек (10% населения страны) страдают ОП, еще 20 млн имеют остеопению. Таким образом, 34 млн человек имеют высокий риск переломов [2]. Первичный (постменопаузальный и сенильный) ОП встречается примерно в 4 раза чаще, чем все формы вторичного, обусловленного каким-либо заболеванием или лекарственной ятрогенией [3—5]. Учитывая растущую продолжительность жизни и сохранение ряда факторов риска, можно ожидать дальнейшего увеличения распространенности ОП.

Современные фармпрепараты для лечения ОП недостаточно эффективны, а их длительное применение может сопровождаться рядом побочных явлений, в том числе вызванных бисфосфонатами, атравматическими переломами костей, увеличением заболеваемости ишемической болезнью сердца, инсультами, эмболией легких, а также эстрогенами или эстроген-заместительной терапией рака яичников и эндометрия [5—8]. В связи с лекарственными ятрогениями стал возрождаться интерес к фитотерапии, которая признается одним из самых безопасных методов лечения острых и хронических заболеваний при условии, что этим занимается дипломированный врач, а не сам пациент. Однако данные по научному обоснованию и практике применения фитотерапии при ОП пока в основном представлены в зарубежной литературе [9—19]. В целом данные всех источников свидетельствуют о целесообразности использования тех или иных формул фитопрепаратов для профилактики и лечения О.П. Особенно активны в этом направлении китайские исследователи.

Среди проходящих санаторно-курортное лечение и оздоровление 19% составляют люди, страдающие О.П. Сообщается о трех разработанных в санатории «Сосны» комплексах санаторно-курортного лечения ОП, каждый из которых включает фитотерапию. В материалах проведенной в 2010 г. в Республике Беларусь конференции «Фитотерапия в условиях санатория» отмечалось, что накопленный бесценный опыт применения фитотерапии остается недостаточно востребованным [20]. Анализ доступных русскоязычных источников выявил парадоксальную ситуацию. На множестве сайтов представлены разнообразные рецепты фитотерапии из области народной медицины для лечения и профилактики ОП без каких-либо ссылок на научные данные. При этом публикации в научных изданиях единичны. Даже в наиболее полном из отечественных руководств по фитотерапии [21] сведений о ее применении при ОП не содержится.

При этом запатентовано несколько фитотерапевтических композиций, предназначенных для лечения и профилактики ОП [22, 23]. В отличие от зарубежных исследований экспериментальная оценка их эффективности была проведена лишь для одной из них, представленной в патенте [24]. В состав этой композиции были отобраны части растений, оказывающих наиболее выраженное влияние на отдельные звенья патогенеза ОП и характеризующихся полипотентным действием:

1) противовоспалительные: береза, вероника, мята длиннолистная, мята перечная, мокрица, солодка, ива, шалфей, черника, осина, ромашка, сенна, крушина, череда, володушка, душица, зюзник, иван-чай, иссоп, мелисса, пион, полынь, ряска, синеголовник, лабазник, чабрец [25];

2) гепатопротекторные: осина, подорожник, володушка, дягиль, золототысячник, зубчатка, люцерна, полынь, репешок, астрагал, солодка;

3) иммуномодулирующие: солодка, подорожник, володушка, дрок, дурнишник, дягиль, зубчатка, иссоп, красный корень, красная щетка, люцерна, медуница, полынь, репешок, синеголовник, смородина, лабазник, чабрец, эхинацея;

4) регенеративные: солодка, горец птичий, подорожник, сушеница, герань кроваво-красная, герань луговая, герань лесная, дурнишник, золотая розга, люцерна, манжетка, мокрица, пикульник, подмаренник, смородина, сныть, астрагал;

5) корректирующие функции эндокринных желез (гипофиза, надпочечников, щитовидной и половых желез): солодка, шалфей, ежевика, подорожник, дрок, дурнишник, зубчатка, зюзник, красный корень, красная щетка, люцерна, манжетка, смородина, сурепка, лабазник, чернобыльник, эхинацея, астрагал;

6) вазопротектирующие: горец перечный, горец птичий, сушеница, посконник, астрагал;

7) стресс-лимитирующие: мята длиннолистная, мята перечная, ромашка, сушеница, душица, дягиль, зюзник, иван-чай, красный корень, красная щетка, мелисса, манжетка, мокрица, пион, первоцвет, посконник, пустырник, синеголовник, лабазник, чабрец, чернобыльник;

минералорегулирующие: солодка, горец птичий, череда, герань кроваво-красная, герань луговая, герань лесная, дурнишник, люцерна, пикульник, подмаренник, сныть, смородина;

9) улучшающие мозговое кровообращение: астрагал, первоцвет, герань, вероника, мята, смородина, посконник, очанка.

Данная фитокомпозиция получила название «Фитокост» [24]. На модели ОП у мышей, индуцированного преднизолоном, было показано, что фитокост оказывает дозозависимый восстановительный эффект хрящевой и костной тканей тазобедренных суставов в диапазоне 50—250 мг/мышь. При дозе 250 мг/мышь наблюдалось восстановление костной ткани до показателей животных контрольной группы [26].

Для повышения водорастворимости и стабильности лекарственных средств в современном фармацевтическом производстве широко применяются циклодекстрины, обладающие способностью образовывать комплексы с рядом органических и неорганических молекул. Это повышает водорастворимость и стабильность лекарственного средства в процессах окисления и гидролиза, в конечном итоге обеспечивая лучшую его доставку к мишени.

Цель работы — исследовать влияние фитокомпозиции (фитокост) с циклодекстрином на восстановление хрящевой и костной тканей в экспериментальной модели ОП.

Эксперименты были проведены на мышах линии Balb/c — самках 5-месячного возраста, массой 20—25 г (питомник «Столбовая» РАН). Мышей содержали в стандартных условиях по 5—7 особей в клетке с контролируемыми режимами температуры (24 °C) и освещения (в течение 12 ч) и свободным доступом к воде и пище. Для моделирования ОП использовали синтетический глюкокортикоид преднизолон, который вводили внутримышечно (в/м) в дозе 1 мг/мышь в течение 14 дней. Доза вводимого преднизолона была выбрана на основе полученных нами ранее данных [26].

Все животные были разделены на 7 групп: 3 контрольных и 4 опытных. В 1—3-й группах было по 5 особей, в 4—7-й — по 7 животных. Первую контрольную группу составили интактные мыши. Животным остальных 6 групп вводили преднизолон. Животных 2-й контрольной группы забивали через 14 дней после последней инъекции преднизолона с помощью цервикальной дислокации и извлекали бедренные кости для гистологического анализа. Животные 3-й контрольной группы после 14 дней инъекций преднизолона находились в клетке в течение 30 дней. Животным 4—7-й групп после 14 дней инъекций преднизолона перорально вводили пипеткой препарат, растворенный в 70 мкл дистиллированной воды, в разных дозах: 5,0; 0,5; 0,05 и 0,005 мг/мышь в течение 30 дней. После 30 дней приема препарата мышей из всех групп забивали для проведения гистологического и морфологического анализа бедренных костей.

В экспериментах был использован водный экстракт композиции фитокост с β-циклодекстрином, произведенный ЗАО НПП «Биомедхим» по ТУ 9291−004−33822935−2014. Экстрагирование осуществляли следующим образом: 500 г сырья заливали 70% раствором этилового спирта в соотношении 1:5, доводили до кипения, охлаждали до 20—25 °С, периодически помешивая в течение 20 ч, затем сырье отжимали и полученный раствор фильтровали от механических примесей. Фильтрат упаривали под вакуумом на роторном испарителе при температуре не выше 40 °C до 10% по объему от исходного количества экстрагента и вычисляли содержание сухих веществ. Из 500 г исходного сырья получалось 255 мл экстракта с содержанием сухих веществ 10,6% (27 г). Компоненты экстракта и β-циклодекстрина смешивали в соотношении 1:10 по сухому весу, тщательно растирали в ступке, переносили на поддон и сушили при 35—40 °С в течение 48 ч. Итоговый вес экстракта с циклодекстрином составлял 380 г.

Кости мышей всех 7 групп фиксировали в 10% формалине, приготовленном на фосфатно-солевом буфере (0,02 М, рН 7,6) 24 ч при комнатной температуре. Декальцинировали в 5% трихлоруксусной кислоте 24—48 ч, затем промывали в фосфатно-солевом буфере и замораживали в изопентане при –40 °С. Далее получали срезы толщиной 10 мкм на криостате Leica (Германия). Срезы высушивали при комнатной температуре в течение 1 ч и окрашивали гематоксилином и эозином с последующим анализом изображения с помощью светового микроскопа Olympus Vanox AH BT3 (Германия), увеличение ×100 и ×40. Изображения фотографировали и в поле зрения проводили морфологический анализ клеток. Для определения достоверности различий между опытными и контрольными группами использовали непараметрический двусторонний критерий Манна—Уитни (U-тест). Достоверными между опытными и контрольными группами считали различия при р<0,05.

Все протоколы и манипуляции с животными были утверждены комиссией по биоэтике Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН (разрешение № 0.5.15/1).

Гистологическое исследование хрящевой ткани головки бедренной кости мышей после 14-дневного введения преднизолона показало значительное увеличение пролиферации хондробластов (115±5; рис. 1, б) по сравнению с контрольной группой животных, не получавших инъекции преднизолона (25±3; см. рис. 1, а; р<0,05). По истечении 30 дней в 3-й группе животных, не получавших соединение экстракта растений с циклодекстрином, количество хондробластов снижалось (43±6; см. рис. 1, в) по сравнению со 2-й группой животных, забитых через 14 дней после введения преднизолона, но было выше, чем у интактных животных.

После приема соединения в дозе 0,5 мг/мышь наблюдалось восстановление гиалинового хряща (21±3; см. рис. 1, д). Число хондробластов снижалось до нормального уровня (1-я группа), тогда как число хондроцитов в поле зрения начинало увеличиваться (достоверность различий между опытной (5-й) и контрольной (2-й) группами р<0,05). После приема соединения в дозе 0,05 мг/мышь количество хондробластов также снижалось (34±3; см. рис. 1, е), однако в меньшей степени, чем при дозе 0,5 мг/мышь, но было ниже, чем в 3-й группе, находившейся 30 дней без приема соединения. При дозе соединения 0,005 мг/мышь число хондробластов составляло 53±5, и несмотря на то, что было достоверно ниже, чем во 2-й группе, не получавшей это соединение, но выше, чем в 1-й и 3-й группах (см. рис. 1, ж). Сниженная активность данного соединения в концентрации 5 мг/мышь (45±3) может быть связана с изменением свойств экстракта растений после образования комплекса с циклодекстрином. Снижение числа хондробластов во всех опытных группах сопровождалось увеличением числа хондроцитов по сравнению с группой животных, получавших только преднизолон (2-я группа).

Через 30 дней в 3-й группе животных, не получавших соединение, в костной ткани была выявлена хаотичная ориентация коллагеновых волокон (рис. 2, в). Прием соединения в дозе 0,5 мг/мышь сразу после окончания курса преднизолона предотвращал эти нарушения (см. рис. 2, д). Другие используемые дозы препарата подобного восстановления коллагеновых волокон не вызывали. Однако после их приема достоверно увеличивалось число остеоцитов и уменьшалось количество остеобластов (см. таблицу).

Нежелательных побочных эффектов при приеме испытанного соединения не наблюдалось. Полученные данные свидетельствуют о его протективном эффекте, наиболее выраженном в дозе 0,5 мг/мышь. Снижение числа остеобластов и увеличение количества остеоцитов под действием препарата в меньших дозах по сравнению со 2-й и 3-й группами (без препарата) также свидетельствует об их положительном эффекте, который проявится, по-видимому, в более поздние сроки. Сведений о профилактических эффектах фитотерапии в научных публикациях обнаружить не удалось, поэтому полученные данные следует рассматривать как новые.

Исходя из представлений традиционной китайской медицины [13, 25], указывается, что ряд лекарственных растений, используемых для тонизации функции почек, могут оказывать положительное действие на метаболизм костной ткани. Эффективность трех из них — травы горянки корейской (herba epimedii), плодов бирючины блестящей (fructus ligustri lucidi) и плодов псоралеи (fructus psoraleae) — была исследована сначала в модели ОП у крыс с удаленными яичниками, а затем в плацебо-контролируемых рандомизированных клинических испытаниях. Результаты показали, что препараты из исследованных компонентов оптимизируют репаративную регенерацию костной ткани. Для дальнейшего исследования остеопротективного действия той же фитоформулы использовали серофармакологический подход. Токсичность постабсорбционных ингредиентов указанных растений, выделенных из сыворотки крови потреблявших их крыс, оценивали в культурах остеобластоподобных клеток UMR106, клеток RAW 264.7 (трансформированные мышиные макрофаги) и мезенхимальных стволовых клеток. Цитотоксических эффектов тестируемой фитоформулы обнаружено не было. Ее активные постабсорбционные сывороточные ингредиенты стимулируют остеогенез и тормозят остеокластогенез [27].

Различия в моделях экспериментального ОП, использованных в наших и зарубежных исследованиях, затрудняют сопоставление их результатов. Исследованная отечественная композиция отличается от зарубежных аналогов существенно бóльшим числом входящих в нее компонентов. Это обстоятельство может расцениваться как обычно критикуемая полипрагмазия. Однако традиционно в национальных медицинских системах преимущественно использовали многокомпонентные лекарственные смеси. Независимо от типа заболевания в фитотерапевтическую рецептуру включались антитоксические, сердечные, седативные, тонизирующие средства, создающие своего рода «круговую оборону организма». Более того, в фитосборы включались несколько компонентов с различными механизмами однонаправленного действия, что обеспечивало потенцирование лечебного действия при одновременном снижении дозы каждого из них, а также коррекцию возможных нежелательных эффектов отдельных компонентов [28, 29].

Отдельные растения применялись лишь при ограниченной симптоматике для улучшения функции отдельных органов, но никогда не назначались при тяжелых заболеваниях. При коморбидности (полисистемных поражениях организма) назначались рецептуры, содержащие до 65 компонентов [30]. Встречаются указания на целесообразность применения еще большего числа компонентов. Например, описано 84 лекарственных растения, которые обладают антидиабетическим действием [31].

Наряду с опытом традиционной фитотерапии многокомпонентность фитокоста следует рассматривать с позиций все более расширяющихся современных представлений о патогенетических механизмах О.П. Исследованная фитотерапевтическая композиция предназначена для воздействия на все известные ныне механизмы патогенеза, тогда как китайские коллеги исходят из древних, не всегда объяснимых с современных позиций, представлений. Немаловажным является и то, что все растения, являющиеся сырьем для производства фитокоста, произрастают на территории Российской Федерации, что обеспечивает эффективное импортозамещение необходимых компонентов.

В экспериментальной модели преднизолонового ОП выявлен дозозависимый протективный эффект фитокоста с циклодекстрином. Наиболее выраженный эффект в виде снижения количества остеобластов и увеличения числа остеоцитов получен при дозе 0,5 мг/мышь. Нежелательных побочных эффектов при приеме испытанного соединения не наблюдалось. Данная композиция содержит существенно большее количество компонентов, чем предлагаемые китайскими коллегами фитосборы, обеспечивает воздействие на все известные ныне механизмы патогенеза ОП и эффективное импортозамещение дорогостоящих зарубежных аналогов.

Дополнительная информация

Источник финансирования. Исследование выполнено за счет собственных средств авторов.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Участие авторов:

Концепция исследования: Е.В.

Дизайн, проведение исследования, обработка результатов: М.И., С.В.

Написание текста: А.В.

Изготовление фитокомпозиции, соединения с циклодекстрином: М.Г.

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями
использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании
файлов cookie, нажмите здесь.

Сбор «Фитокост премиум», 100шт.
Сбор «Фитокост премиум», 100шт.